人腺病毒F41型染料法荧光定量PCR试剂盒

人腺病毒F41型染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒采用荧光染料法（如SYBR Green I），通过实时监测PCR扩增过程中荧光信号的累积，定量检测样本中人腺病毒F41型（HAdV-41）的DNA载量。染料与双链DNA结合后，激发光波长471 nm，发射光波长530 nm，信号采集建议在复性或延伸阶段进行。

组成成分

预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及优化剂。

荧光染料：特异性结合双链DNA的荧光染料。

阳性对照：含HAdV-41特异性靶序列。

阴性对照：无核酸酶水。

操作步骤

样本处理：按标准方法提取待测样本DNA。

反应体系：每20 μL反应包含预混液、引物探针、模板DNA及染料。

PCR程序：

预变性：95℃ 2分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

数据分析：

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：

阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30；

样本Ct≤35判为阳性，Ct≥40判为阴性；

Ct值35-40需复测，复测Ct<40判为阳性。

注意事项

实验前需校准荧光定量PCR仪，确保波长设置匹配（激发/发射光：471 nm/530 nm）。

避免试剂反复冻融，分装保存以维持稳定性。

操作需在无菌环境下进行，防止交叉污染。

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