鼠痘(脱脚病)病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Mousepox Virus (Ectromelia Virus) Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3261
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板,试剂盒包含预混优化引物、探针及反应体系。
高灵敏度:可检测低至几百拷贝/反应的病毒核酸,线性范围覆盖5个数量级。
高特异性:引物针对鼠痘病毒保守序列设计,避免与其他病原体核酸交叉反应。
内控设计:含阳性对照(非活病毒,为DNA片段),便于区分假阴性结果。
兼容性:适配常见荧光定量PCR仪,需根据机型添加ROX校正染料(可选)。
检测原理
采用SYBR Green染料法,通过实时监测PCR扩增过程中荧光信号变化,定量分析病毒核酸载量。
操作步骤
样品准备
提取待测样本DNA,建议使用商品化病毒核酸提取试剂盒。
阳性对照稀释(示例):
将10^8拷贝/μL的阳性对照按10倍梯度稀释至10^2拷贝/μL(需独立操作避免污染)。
PCR反应体系配制
每20μL反应体系包含:
预混PCR缓冲液
引物对
SYBR Green染料
DNA模板(≤5μL)
短暂离心混匀,避免气泡。
上机检测
按仪器说明书设置程序:
预变性:95℃ 5分钟
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40循环)
熔解曲线分析:60℃~95℃(可选)
注意事项
实验分区操作,避免交叉污染。
试剂解冻后需完全混匀,避免反复冻融。
熔解曲线分析可验证扩增特异性。
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