冬虫夏草源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专用于检测冬虫夏草（Ophiocordyceps sinensis）源性成分。通过特异性引物扩增目标DNA序列，SYBR Green染料嵌入双链DNA后释放荧光信号，实现高灵敏度、高特异性的定性或定量分析。

产品特点

高灵敏度：检测限低至100拷贝/反应，适用于微量样本分析。

操作简便：即开即用，用户仅需提供DNA模板。

广谱适用性：适用于冬虫夏草及其制品（如提取物、保健品）的源性鉴定。

成本优势：染料法无需探针，降低实验成本。

兼容性：适配主流荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad、Roche等）。

保存条件与有效期

保存温度：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（生产日期见包装标签）。

规格与成分

规格：50次/盒（20μL反应体系）。

主要成分：

预混PCR Master Mix（含SYBR Green I、dNTPs、Taq DNA聚合酶）

冬虫夏草特异性引物对

阳性对照（冬虫夏草基因组DNA）

无核酸酶水

实验流程

样本DNA提取：使用柱式或磁珠法提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制（20μL）：

预混Master Mix：10μL

引物混合液：2μL

DNA模板：2μL

无核酸酶水：6μL

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）

熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃递增

数据分析

定性检测：通过熔解曲线峰（Tm值）判定特异性扩增。

定量检测：通过标准曲线计算目标基因拷贝数。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免DNA污染。

建议设置阴性对照（无模板）和阳性对照。

熔解曲线出现多峰需排查引物二聚体或非特异性扩增。

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