精氨酸支原体染料法荧光定量PCR试剂盒

精氨酸支原体染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于检测精氨酸支原体（Mycoplasma arginini）核酸，具有高灵敏度和特异性，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。

规格与成分

反应体系：50次/盒（20μL/反应）

主要组分：

2×qPCR预混液（含荧光染料）

精氨酸支原体特异性引物混合物

阳性对照（1×10^8 拷贝/μL）

荧光PCR专用模板稀释液

使用手册

操作步骤

1. 样本处理

DNA提取：按标准方法提取样本DNA，建议使用商业提取试剂盒。

阳性对照稀释：按10倍梯度稀释阳性对照（10^2~10^7拷贝/μL），需独立操作避免污染。

2. 试剂配制（试剂准备区）

反应液配制（冰上操作）：

2×qPCR预混液 10μL

引物混合物 2μL

DNA模板 2μL

补足无核酸酶水至20μL。

3. PCR扩增（核酸扩增区）

程序设置：

预变性：95℃ 3-5分钟；

循环阶段（35次）：95℃ 40秒 → 58℃ 30秒 → 72℃ 60秒；

终延伸：72℃ 7分钟。

4. 结果分析

定量检测：以阳性对照Ct值绘制标准曲线，计算样本浓度。

判定阈值：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型视为阳性。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。

试剂保存：-20℃避光保存，使用前充分混匀并短暂离心。

防污染措施：

使用一次性耗材（吸头、手套）；

实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面及仪器。

质量控制：每次实验需包含阴性对照（无模板水）及阳性对照。

运输与储存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）；

保存期限：-20℃保存1年，避免反复冻融。

声明

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。操作需符合实验室生物安全规范。

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