安氏网尾线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 安氏网尾线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Dictyocaulus arnfieldi Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3478 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测安氏网尾线虫（Dictyocaulus arnfieldi）的核酸。通过优化引物设计和高灵敏度荧光信号检测，可实现对病原体的精准定量分析，适用于临床诊断、兽医检测及科研领域。
技术参数
检测原理：采用SYBR Green等荧光染料，实时监测PCR扩增过程中双链DNA的荧光信号。
特异性：引物针对安氏网尾线虫保守基因区域（如ITS或线粒体基因）设计，与其他线虫（如捻转血矛线虫）无交叉反应。
灵敏度：检测限低至100拷贝/毫升，可识别早期或低载量感染。
反应体系：50T/盒，支持标准96孔板或单管操作。
试剂盒组成
PCR预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料。
引物混合液：特异性扩增安氏网尾线虫靶序列。
阳性对照：含安氏网尾线虫标准DNA片段。
阴性对照：无核酸酶水，用于排除污染。
使用说明书（含标准曲线构建方法）。
操作流程
样本处理：提取待测样本DNA（建议使用柱式提取法）。
反应配制：按以下比例混合（以20μL体系为例）：
预混液10μL
引物混合液1μL
模板DNA 2μL
无核酸酶水7μL
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）
数据分析：通过阈值循环数（Ct值）定量，参照标准曲线计算病原体载量。
注意事项
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
防污染措施：建议在独立PCR分区操作，使用带滤芯吸头。
质量控制：每批次实验需包含阴阳性对照，确保结果可靠性。
应用领域
动物呼吸道寄生虫感染的早期诊断。
牧群健康监测与流行病学调查。
抗寄生虫药物疗效评估。
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