网尾线虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Dictyocaulus spp. Universal Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3479
产品原理与特点
技术原理：基于染料法荧光定量PCR技术，靶向网尾线虫高度保守的VP1基因区域设计特异性引物，通过实时荧光信号检测实现定量分析。
核心优势：
高灵敏度：可检测低至单个病原体拷贝的模板。
高特异性：引物经优化，仅扩增网尾线虫属（Dictyocaulus spp.），无交叉反应。
便捷性：预混反应体系（含酶、dNTPs、缓冲液等），用户仅需提供DNA模板。
质控保障：提供阳性对照，有效区分假阴性结果。
操作步骤
1. 样本制备
DNA提取：推荐使用柱式病毒DNA提取试剂盒或自选方法，确保模板纯度。
2. PCR反应体系配制（以50μL体系为例）
| 组分 | 体积（μL） |
| 预混Master Mix | 25 |
| 引物探针混合液 | 5 |
| 模板DNA | 5-10 |
| 无核酸酶水 | 补至50 |
3. 反应程序
| 步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95 | 5 min | 1 |
| 变性 | 95 | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60 | 30 sec | |
4. 数据分析
使用荧光定量PCR仪采集Ct值，通过标准曲线计算模板浓度。
注意事项
实验环境：避免核酸污染，建议在超净台或PCR专用区域操作。
试剂保存：反复冻融可能降低活性，建议分装保存。
质控要求：每批次实验需包含阴性对照（无模板水）和阳性对照。
应用领域
动物寄生虫病诊断（如牛、羊肺线虫病）。
病原体载量监测与流行病学研究。
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