耐久肠球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 耐久肠球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Enterococcus durans Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3631 |
用途：科研用途（不可用于临床诊断）
检测方法：染料法荧光定量PCR
反应体系：20μL/次，50次反应
保存条件：-20℃避光保存，低温运输
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测样品（DNA/RNA模板）。
高特异性：引物基于耐久肠球菌保守序列设计，无交叉反应。
灵敏度高：检测下限可达几百拷贝/反应。
双重功能：支持定性与定量检测（定量线性范围≥5个数量级）。
防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。
阳性对照：含无传染性DNA片段（1×10^8拷贝/μL），用于标准曲线制备及假阴性判定。
试剂盒组成
| 成分编号 | 组分名称 | 规格/包装 |
| 2×qPCR MagicMix| 预混PCR反应液 | 500μL（棕色管） |
| 荧光PCR稀释液 | 模板稀释液 | 1mL（黄盖） |
| 引物混合物 | 耐久肠球菌特异性引物 | 100μL（白盖） |
| 阳性对照 | 1×10^8拷贝/μL DNA片段 | 50μL |
操作步骤
1. 标准曲线制备（以10^2~10^7拷贝/μL为例）
稀释操作需在独立区域进行，避免污染。
标记6管（2~7号），每管加45μL稀释液。
取5μL阳性对照加入7号管，震荡混匀（10^7拷贝/μL），依次10倍稀释至2号管（10^2拷贝/μL）。
2. PCR反应体系
按20μL体系配制：
10μL 2×qPCR MagicMix
2μL 引物混合物
2μL 模板DNA
6μL 无核酸酶水
3. 上机程序
预变性：95℃ 5分钟
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环）
熔解曲线分析（可选）。
注意事项
阳性对照为高浓度DNA，避免反复冻融。
实验分区操作（试剂配制、样本处理、扩增区分离）。
使用带滤芯枪头，防止气溶胶污染。
不同仪器需优化反应参数。
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