光滑念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 光滑念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Candida glabrata Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3655 |
产品概述
本试剂盒采用SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专用于光滑念珠菌（Candida glabrata）核酸的高灵敏检测与定量。适用于临床样本、环境微生物及科研实验中真菌DNA的快速精准分析，具备高特异性、宽线性范围和良好的重复性。
组分列表
2×荧光PCR预混液：含优化缓冲体系、dNTPs及热启动DNA聚合酶。
阳性对照：10^8拷贝/μL光滑念珠菌特异性DNA片段（非活体样本，避免生物污染风险）。
阴性对照：无核酸酶水。
荧光PCR专用模板稀释液：用于标准品梯度稀释。
使用说明书（当前文档）。
操作步骤
标准品稀释（示例：10^2–10^7拷贝/μL梯度制备）
分区操作：在独立洁净区域进行，避免交叉污染。
稀释流程：
标记6管，编号7至2，每管预加45 μL稀释液。
7号管加入5 μL原液（10^8拷贝/μL），涡旋混匀，得10^7拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管（10^2拷贝/μL），每次更换枪头，混匀后冰上保存。
PCR反应体系配制
每20 μL反应体系：
10 μL 2×预混液
0.4 μL上下游引物（终浓度0.2 μM）
2 μL模板DNA
补足无核酸酶水至终体积。
扩增程序
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60–95℃，每0.5℃递增，验证产物特异性。
性能参数
灵敏度：最低检测限10拷贝/μL（DNA模板）。
特异性：不与近平滑念珠菌（C. parapsilosis）等其他常见病原体交叉反应。
稳定性：预混液4℃保存24小时性能无显著变化。
线性范围：10^2–10^7拷贝/μL（R²≥0.99）。
注意事项
阳性对照需单独处理，避免污染实验环境。
推荐使用带滤芯枪头及分区操作台。
熔解曲线出现多峰需排查引物二聚体或非特异扩增。
本产品仅限科研用途。
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