检验原理
本试剂盒基于荧光定量RT-PCR技术,针对费兰杜病毒基因保守区域设计特异性引物,通过染料法实时监测扩增过程中的荧光信号,实现病毒核酸的定性及定量检测。反应体系中,病毒RNA模板经逆转录和扩增后释放荧光,仪器通过检测信号强度输出Ct值,判定样本中病毒载量。
产品名称
费兰杜病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Ferlavirus Dye-based qRT-PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3549
试剂组成
扩增液:100μL/管
反应液:900μL/管
荧光PCR专用模板稀释液:1 mL
PCR引物混合物:100μL
阳性对照:1管(具体体积依不同)
技术特点
高特异性:引物针对病毒保守序列设计,无交叉反应。
高灵敏度:检测限低至10-100拷贝/反应(不同存在差异)。
操作简便:预混试剂即开即用,仅需加入模板RNA。
防污染设计:一管式闭管检测,避免气溶胶污染。
储存与运输
储存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输要求:低温泡沫箱加冰密封运输。
操作步骤
样本处理
使用病毒RNA提取试剂盒提取样本RNA。
阴性/阳性质控品无需提取,直接使用。
反应体系配制(以20μL为例)
反应液19μL + 酶1μL + 模板RNA5μL。
PCR扩增
按仪器要求设置参数(如ABI7500需ROX校正)。
推荐程序:逆转录50℃ 15min→预变性95℃ 2min→扩增(95℃ 15s→60℃ 30s,40循环)。
结果判读
阳性:Ct值≤35.0且扩增曲线呈指数增长。
可疑:35.0<Ct≤37.0,需复测确认。
阴性:Ct值>37.0或无Ct值。
注意事项
分区操作:试剂配制、样本处理、扩增需在独立区域进行。
防污染措施:使用带滤芯吸头,实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。
样本要求:避免反复冻融(≤3次),-20℃保存。
局限性
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
操作需严格遵循生物安全规范,避免假阳性/假阴性结果。
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