辛德毕斯病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Sindbis Virus Dye-based qRT-PCR Kit
规格
50T
货号
PR3818
预期用途：
用于辛德毕斯病毒RNA的定性或定量检测。该病毒属披膜病毒科甲病毒属，通过蚊媒传播，可导致人类发热、皮疹、关节炎及脑炎等症状，需与登革热等虫媒病毒病鉴别诊断。
检测原理：
基于荧光定量RT-PCR技术，通过特异性引物和荧光染料（如SYBR Green I）或探针，对病毒RNA进行逆转录扩增，实时监测荧光信号，实现病毒核酸的高灵敏度检测。
试剂盒组分：
主反应混合液：含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs及缓冲液。
引物-探针干粉：需用165 μL超纯水复溶，-20℃保存。
阳性对照（1×10^7 拷贝/μL）：用于质控。
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL。
使用手册：含操作流程及数据分析方法。
操作步骤：
RNA提取：建议采用商业RNA提取试剂盒，避免降解。
反应体系配制：
取主混合液、复溶引物探针、模板RNA（建议5 μL）及无核酸酶水，总体积20-25 μL。
PCR程序设置：
逆转录：50℃ 15分钟；
预变性：95℃ 2分钟；
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）。
性能参数：
灵敏度：最低检测限100拷贝/反应。
特异性：引物经优化，不与登革热、基孔肯雅热等病毒交叉反应。
注意事项：
实验需在无核酸污染环境下进行，建议使用防污染试剂（如UDG酶）。
阳性对照与待测样本需分区域操作，避免交叉污染。
复溶后的引物探针需分装保存，避免反复冻融。
储存与运输：
-20℃避光保存，有效期12个月；干冰运输。
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