猪痢疾短螺旋体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 猪痢疾短螺旋体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Brachyspira hyodysenteriae Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3819 |
产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，特异性检测猪痢疾短螺旋体（Brachyspira hyodysenteriae）的DNA，适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物、荧光染料、反应缓冲液及对照品，具有高灵敏度和特异性，可同时支持定性与定量分析。
组成与保存条件
主要组分：
预混PCR反应液（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲体系）
荧光染料（游离态吸收峰471 nm，结合DNA后吸收峰500 nm，发射峰530 nm）
阳性对照（非传染性DNA片段）
阴性对照（无核酸酶水）
标准曲线样品（10^2–10^7拷贝/μL梯度稀释）
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
操作步骤
样本处理：
使用推荐方法提取样本DNA，避免交叉污染。
标准曲线制备：
按说明书稀释标准品，独立操作防止污染。
PCR反应体系：
每20 μL反应体系含预混液、引物、荧光染料及模板DNA。
扩增程序：
按仪器推荐设置：预变性（95℃, 2 min）→ 40循环（95℃ 15 s, 60℃ 30 s，信号采集）。
数据分析：
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。
定性检测：阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30；样本Ct≤35判为阳性，≥40为阴性，35–40需复测。
注意事项
严格分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），使用一次性耗材。
反应液避光保存，避免气泡干扰。
实验后需用10%次氯酸或75%乙醇消毒工作台。
本试剂盒仅限科研使用，临床诊断需结合其他检测方法。
局限性
病原体基因变异或提取效率差异可能导致假阴性。
运输或保存不当会影响检测准确性。
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