预期用途
本试剂盒用于体外定性检测人全血样本中的班氏丝虫（Wuchereria bancrofti）特异性DNA，适用于临床辅助诊断及流行病学调查。
产品名称 | 班氏丝虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Wuchereria bancrofti Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3773 |
检验原理
采用TaqMan探针法荧光定量PCR技术：
探针设计：5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团，探针磷酸化以阻止延伸。
信号释放：PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，使报告基团与淬灭基团分离，产生荧光信号。
定量分析：通过实时监测荧光强度（激发波长471 nm，发射波长530 nm），结合标准曲线计算靶DNA浓度。
主要组成成分
qPCR反应液（2×）：1.1 mL ×1管
引物探针混合液：100 μL ×1管
阳性对照：200 μL ×1管（含班氏丝虫特异性DNA）
阴性对照：200 μL ×1管（无靶标DNA）
操作步骤
样本处理：提取待测样本DNA，建议使用血液DNA提取试剂盒。
反应体系配制：按比例混合qPCR反应液、引物探针混合液及模板DNA。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 2分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（信号采集）
数据分析：
定性检测：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30；样本Ct≤35判为阳性，≥40为阴性，35-40需复测。
定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算样本浓度。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免交叉污染。
试剂解冻后需充分混匀，分装使用以减少冻融次数。
若扩增曲线异常或对照结果不符，需重新检测。
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关键字： 班氏丝虫;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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