兔RANTESelisa试剂盒
产品简介:
兔RANTES ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等多种生物样本中的调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5),采用双抗体夹心法,具有高灵敏度和特异性,结果准确可靠。
英文名称 | Rabbit RANTES ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130064 | 规格 | 48T/96T |
1. 检测原理
微孔板预包被抗兔RANTES抗体,样本中的RANTES与抗体结合后,加入酶标检测抗体,形成免疫复合物,通过TMB显色反应,颜色深浅与样本中RANTES浓度成正相关。
2. 主要组成
预包被抗体的微孔板
酶标抗体
标准品
TMB显色液
终止液
洗涤液

3. 操作步骤
将标准品和待测样本加入微孔,37℃孵育30-90分钟
洗涤3-5次,拍干
加酶标抗体工作液,37℃孵育60分钟
洗涤,拍干
加TMB显色液,避光反应10-30分钟
加终止液,酶标仪450nm读数
4. 样本处理与保存
血清、血浆、组织匀浆、细胞上清均可检测
避免反复冻融,分装后-20℃或-70℃保存
试剂盒2-8℃保存,标准品和酶标抗体避免冻融
5. 应用领域
用于兔炎症、免疫调节、趋化因子相关疾病及HIV研究。
注意事项
严格按照说明书操作,加样、温育、洗涤需规范,显色避光,终止液加入后及时测定。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
关键字: 兔;RANTES ;ELISA试剂盒;
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