检测原理
基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对质型多角体病毒基因组高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增，实现定性及定量分析。
产品名称 | 质型多角体病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cytoplasmic Polyhedrosis Virus (CPV) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3899 |
样本要求
采集：按常规方法采集样本（如昆虫组织、环境样本等）。
保存与运输：需低温运输（-20℃保存），保存期限为1年。阳性对照需单独存放，避免污染。
自备试剂：样本DNA提取试剂。
操作步骤
阳性对照稀释（以10E2-10E7拷贝/μL梯度为例）：
标记离心管（7-2号），依次加入45 μL专用稀释液。
从7号管（初始浓度1×10E8拷贝/μL）开始，逐级稀释至2号管（1×10E3拷贝/μL），每步震荡混匀1分钟，冰上暂存。
反应体系配制：
避光条件下将各组分（预混液、引物、模板DNA）按比例混合，避免气泡。
PCR扩增：
按仪器说明书设置程序：预变性（95℃, 2分钟）→循环阶段（95℃ 15秒→60℃ 30秒，40循环）→熔解曲线分析。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，防止交叉污染。
防护措施：使用一次性耗材（吸头、手套），实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。
试剂保存：反应液需避光，组分使用前需充分融化并离心混匀。
质量控制
阴性/阳性对照：每批次实验需包含无模板对照（NTC）和阳性对照，以验证试剂有效性。
标准曲线：定量分析时需使用6个浓度梯度标准品生成标准曲线（R²≥0.99）。
结果判读
定性：Ct值≤35且熔解曲线峰值单一判为阳性。
定量：根据标准曲线计算样本病毒拷贝数。
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关键字： 质型多角体病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;