产品概述
本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，专为克雷伯菌属（Klebsiella spp.）的快速、高灵敏度检测而设计。适用于临床样本、环境监测及科研实验中克雷伯菌的定性和定量分析，检测限可达数百拷贝/反应。
规格：50次/盒（20μL反应体系）
保存条件：-20℃避光保存，有效期1年。
适用范围：科研用途，严禁用于临床诊断或其他非科研场景。
产品名称 | 克雷伯菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Klebsiella spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3970 |
试剂盒组分
| 组分名称 | 规格/数量 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 500μL |
| 克雷伯菌通用引物干粉 | 50T（需复溶） |
| 阳性对照（无传染性DNA） | 50μL（1×10^7拷贝/μL） |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL |
| 超纯水 | 1mL |
实验流程
样本准备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
引物复溶：离心引物干粉后，加入110μL超纯水混匀，分装保存于-20℃。
反应体系配制（20μL/反应）：
2×SYBR MasterMix：10μL
正向/反向引物：各0.5μL
DNA模板：2μL
超纯水补足至20μL。
PCR程序：
预变性：95℃ 5min
循环阶段（40 cycles）：95℃ 10s → 60℃ 30s（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60℃~95℃，升温速率0.5℃/s。
数据分析
定性检测：熔解曲线单峰且Ct值≤35判为阳性。
定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本拷贝数。
注意事项
操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。
阳性对照需与样本分区域处理，使用带滤芯枪头。
若用于定量，需确保标准曲线线性范围覆盖10^1~10^6拷贝/μL。
试剂开封后需短暂离心，避免液体挂壁。
性能参数
特异性：针对克雷伯菌属保守序列设计，与其他常见病原体无交叉反应。
灵敏度：最低检测限100拷贝/反应（视样本质量可能波动）。
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关键字： 克雷伯菌通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;