伯克氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 伯克氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Burkholderia spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4309 |
检验原理
采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对伯克氏菌属高度保守基因序列设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量分析。
试剂盒组成
扩增反应液：含预混PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green染料（950μL/管）。
引物混合液：伯克氏菌属特异性引物（100μL/管）。
阳性质控品：伯克氏菌标准核酸（50μL/管）。
阴性质控品：无核酸酶水（50μL/管）。
模板稀释液：用于样本核酸稀释（1mL/管）。
说明书：1份。
注意：不同批号组分不可混用，试剂盒内组分满足50次检测需求。
储存条件及有效期
储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。
有效期：12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500/StepOnePlus
Roche LightCycler系列
Bio-Rad CFX系列
MX3000P/3005P
Eppendorf Mastercycler ep realplex
自备耗材：无核酸酶离心管（0.2mL/1.5mL）、滤芯吸头（10μL/200μL/1000μL）、离心机、移液器等。
样本要求
样本类型：胃液分泌物、培养物等（需避免交叉污染）。
保存条件：
短期：-20℃（≤1个月）；
长期：-70℃（≤6个月）。
运输：2~8℃冰袋运输，禁止反复冻融。
操作步骤
样本处理：按规范提取核酸，建议使用商业提取试剂盒。
反应体系配制：
取18μL反应液 + 2μL模板DNA（或阴/阳对照）。
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。
数据分析：根据扩增曲线和Ct值判定结果。
性能参数
灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应。
特异性：引物针对伯克氏菌属保守序列，无交叉反应。
重复性：批内/批间变异系数≤5%。
注意事项
实验分区操作（样本处理区、PCR扩增区），避免污染。
阳性质控品需单独存放，防止污染其他试剂。
失效或开封后未使用完毕的试剂需标记并弃置。
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