巨细胞病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Cytomegalovirus Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4302
产品用途
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术,专用于检测巨细胞病毒(CMV)核酸,适用于科研领域,不可用于临床诊断。
产品特点
即开即用:用户仅需提供病毒DNA模板,操作简便。
高灵敏度:检测限可达几百拷贝/反应。
高特异性:引物针对巨细胞病毒保守序列设计,无交叉反应。
防污染设计:一管式封闭检测,避免后续污染。
定量功能:线性范围覆盖至少5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
规格与组分
2×qPCR MagicMix:500 μL(预混含染料、dNTPs、聚合酶等)
荧光PCR专用模板稀释液:1 mL
巨细胞病毒PCR引物混合物:100 μL
PCR阳性对照(1×10⁸拷贝/μL):50 μL
使用手册:1份
保存与运输
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输方式:低温干冰运输。
自备试剂
DNA模板(待测样品)
10×ROX校正染料(根据机型需求,参见说明书)。
操作步骤
阳性对照稀释(以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例)
注意事项:
操作需在独立区域进行,避免污染试剂盒其他组分。
使用带滤芯枪头,全程置于冰上。
稀释步骤:
标记6管为7至2号,每管加45 μL稀释液。
7号管加5 μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀,得1×10⁷拷贝/μL。
依次梯度稀释至2号管(1×10²拷贝/μL)。
PCR反应体系(20 μL体系)
按比例混合2×qPCR MagicMix、引物、模板DNA及ROX(若需)。
上机程序:
预变性:95℃ 3分钟;
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)。
结果判读
通过标准曲线(Ct值-对数浓度)计算样品拷贝数。
无模板对照(NTC)应无扩增曲线。
注意事项
阳性对照需单独存放,避免反复冻融。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
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