猪痢疾密螺旋体染料法荧光定量PCR试剂盒

猪痢疾密螺旋体染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，特异性检测猪痢疾密螺旋体（Brachyspira hyodisenteriae）的核酸，适用于临床样本（如胃液分泌物、呕吐物或培养物）的快速定量分析。检测基于SYBR Green等染料的荧光信号累积原理，通过实时监测扩增产物实现定量。

组分与规格

阴性质控品：50 μL ×1管

PCR反应液：含预混Buffer、dNTPs、热启动DNA聚合酶等

引物混合液：特异性扩增猪痢疾密螺旋体靶基因

说明书：1份

注意：不同批号组分不可混用，试剂盒内组分可满足标示检测次数（如50次/盒）。

储存与运输

储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。

运输要求：低温（-20℃）运输，需使用冰袋（2~8℃）。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 系列（如7500、StepOnePlus）

MX3000P/3005P

LightCycler（Roche）

Bio-Rad（CFX系列）

Eppendorf

自备耗材与设备

无核酸酶的离心管（1.5 mL、0.2 mL PCR管）

滤芯吸头（10 μL、200 μL、1000 μL）

离心机、振荡混合器、移液器

样本要求

样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物，采集需符合《临床微生物样本采集规范》。

保存条件：

短期：-20℃（≤1个月）

长期：-70℃（≤6个月），避免反复冻融。

运输：2~8℃冰袋运送。

操作步骤

样本处理：按规范提取核酸，避免交叉污染。

反应体系配制：在冰上按比例混合PCR反应液、引物及模板DNA。

上机检测：按仪器说明书设置程序（通常包括预变性、扩增循环、熔解曲线分析）。

结果判读

通过阈值循环数（Ct值）定量，结合标准曲线计算病原体拷贝数。

熔解曲线需单一峰以确保扩增特异性。

注意事项

实验分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区分离），防止污染。

阳性对照需独立稀释（如10^2–10^7拷贝/μL梯度），避免污染其他组分。

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