产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专为快速、灵敏检测构巢曲霉核酸设计。适用于科研用途，可完成50次20μL体系的反应。
产品名称
构巢曲霉染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Aspergillus nidulans Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4201
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品RNA模板，预混优化引物及反应体系。
高灵敏度与特异性：引物针对构巢曲霉高度保守区设计，避免交叉反应。
内置对照：含阳性对照，有效区分假阴性结果。
标准化操作：支持标准曲线法定量分析，扩增程序及数据分析方法详见附录。
实验流程
样本准备：
待测样本DNA需纯化至终浓度0.1 pg–10 ng/μL（推荐0.5–1 ng/μL）。
阳性对照需梯度稀释（1×10⁶至1×10¹拷贝/μL）以构建标准曲线。
反应体系配制（以20μL为例）：
终浓度要求：
Taq酶：0.5–5 U
dNTPs：0.1–5 mM
DPO引物对：50–500 nM
MgCl₂：0.8–10 mM
DMSO：1–15%
SYBR Green I染料：0.5–2×
扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40–45次）：95℃ 15秒→60℃ 30秒（荧光采集）；
熔解曲线分析：60–95℃（0.5℃/秒）。
结果判读
扩增曲线：Ct值≤35且熔解曲线为单一峰，判为阳性。
定量分析：通过标准曲线计算模板浓度（log值换算）。
注意事项
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作分区（试剂配制、模板添加、扩增区）需严格隔离，避免污染。
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