耶氏肺孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 耶氏肺孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Pneumocystis jirovecii Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4334 |
产品用途
科研使用,适用于耶氏肺孢子虫的定性及定量检测。

产品特点
高灵敏度:优化的引物设计可检测低至10³拷贝/μL的模板,无需增菌。
特异性强:引物基于保守序列设计,与其他病原体无交叉反应。
即开即用:预混PCR反应液(含染料),仅需提供DNA模板。
双重检测功能:支持定性和定量分析,定量线性范围达5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
内控设计:提供阳性对照(非活体DNA片段),避免假阴性干扰。
包装组分
| 编号 | 成分 | 规格/包装 | 备注 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) | 含荧光染料、dNTPs |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) | 稀释模板用 |
| 试剂三 | 引物混合液 | 100 μL(白盖) | 特异性引物及探针 |
| 试剂四 | 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) | 非传染性DNA片段 |
| —— | 说明书 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |
操作流程
1. 阳性对照稀释(示例:10²~10⁷梯度)
在独立洁净区操作,避免污染。
取6管,分别标记为2~7号,每管加45 μL模板稀释液。
7号管加5 μL原液(10⁸拷贝/μL),涡旋混匀得10⁷拷贝/μL梯度,依次稀释至10²拷贝/μL。
2. PCR反应体系配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| PCR MagicMix 3.0 | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| 超纯水 | 6 |
3. 扩增程序(以常见仪器为例)
预变性:95℃ 5分钟;
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
溶解曲线分析:60℃~95℃,每0.5℃升温5秒。
注意事项
避免污染:阳性对照与样本分区域操作,使用带滤芯枪头。
质量控制:每批实验需包含阴性对照(超纯水替代模板)。
数据判读:Ct值≤35且溶解曲线单峰视为阳性。
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关键字: 耶氏肺孢子虫;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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