粘质沙雷菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Serratia marcescens Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4345
产品特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混优化引物及反应体系。
高灵敏度与特异性：针对粘质沙雷菌保守序列设计引物，检测限低至几百拷贝/反应，无交叉反应。
双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
内置对照：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL DNA片段），便于区分假阴性。
防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。
试剂盒组成
2×qPCR MagicMix：500μL（含染料、dNTPs、聚合酶等）
荧光PCR专用模板稀释液：1mL
粘质沙雷菌PCR引物混合物：100μL
阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）：50μL
使用手册：1份
自备试剂：DNA模板、10×ROX（依机型需求）。
操作步骤
1. 标准曲线制备（定量分析适用）
标记6管（7~2号），每管加45μL稀释液。
梯度稀释阳性对照：7号管加5μL原液（10⁸拷贝/μL）→ 依次稀释至10⁷~10²拷贝/μL（每步换枪头）。
2. 样品DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA，建议设置阴/阳性对照各1管。
3. qPCR反应体系（20μL）
按以下比例混合：
2×qPCR MagicMix：10μL
引物混合物：2μL
DNA模板：1μL（50ng~1μg）
ddH₂O：补至20μL
程序设置：
预变性：93℃ 3~5min
扩增循环（30~35次）：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s
终延伸：72℃ 7min
注意事项
标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。
反应体系分装建议在冰上操作，减少酶活性损失。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
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