尤氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 尤氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Theileria uilenbergi Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4630 |
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对尤氏泰勒虫基因高度保守区域设计特异性引物，通过体外扩增检测核酸。反应过程中，荧光信号强度与PCR产物量成正比，通过仪器实时监测荧光通道信号，实现定性或定量分析。
试剂组成
扩增液：50μL/管（含预混酶、dNTPs、缓冲液等）。
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL（用于标准曲线制备及样品稀释）。
尤氏泰勒虫特异性引物混合物：100μL（优化引物浓度，确保高灵敏度）。
阳性对照（无传染性DNA片段）：50μL（1×10^8拷贝/μL，用于质控）。
2×qPCR MagicMix：500μL（含SYBR Green染料，即开即用）。
产品特点
高特异性：引物针对尤氏泰勒虫保守序列设计，无交叉反应。
高灵敏度：检测限低至几百拷贝/反应。
操作简便：一管式预混体系，减少污染风险。
应用范围：仅限科研用途，不可用于临床诊断。
操作方法
标准曲线制备（以10^2–10^7拷贝/μL为例）：
梯度稀释阳性对照（6个浓度点），每稀释步骤使用独立枪头。
示例：取5μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入45μL稀释液，震荡混匀，得到10^7拷贝/μL标准品，依次稀释至10^2拷贝/μL。
加样与扩增：
按20μL体系配制反应液（含模板DNA、引物、预混液）。
荧光定量PCR仪程序：预变性（95℃, 3 min）→ 40循环扩增（95℃, 15 s；60℃, 30 s）。
结果分析：
定性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
定量：根据标准曲线计算模板拷贝数。
注意事项
避免反复冻融试剂，稀释液需避光保存。
操作分区进行（样本处理、PCR配制、扩增区），防止污染。
阳性对照为DNA片段，无生物危害性。
储存与运输
保存条件：-20℃避光，有效期12个月。
运输方式：冰袋低温运输。
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