水牛泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 水牛泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Theileria buffeli Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4626 |
产品基本信息
检测技术：染料法荧光定量PCR（SYBR Green I或其他兼容染料）
应用范围：水牛泰勒虫（Theileria buffeli）核酸的定性与定量检测，适用于科研用途，不可用于临床诊断。
规格：50次反应（20μL体系/次）
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（建议冻融次数＜7次），有效期12个月。
试剂盒组成
PCR反应预混液：含优化引物、DNA聚合酶、dNTPs及荧光染料。
阳性质控品：无传染性DNA片段（1×10⁸拷贝/μL）。
阴性质控品：无核酸酶水或缓冲液。
荧光PCR专用模板稀释液：用于标准曲线制备。
说明书及质检报告。
技术参数
灵敏度：≤10拷贝/μL。
线性范围：5个数量级（定量检测）。
特异性：引物针对水牛泰勒虫高度保守区设计，不与常见微生物核酸交叉反应。
实验操作流程
1. 样本准备
待测样本需提取DNA（推荐使用商业化核酸提取试剂盒）。
阳性质控品可直接使用，无需提取。
2. 标准曲线制备（定量检测适用）
将阳性质控品按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），每个浓度需独立操作以避免污染。
3. PCR反应体系
按20μL体系配制：
预混液10μL
模板DNA 2μL
无核酸酶水补至20μL。
推荐程序：
预变性：95℃ 5分钟
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环）
熔解曲线分析（染料法需验证扩增特异性）。
4. 结果判读
定量分析：根据标准曲线计算样本拷贝数。
定性分析：Ct值≤35且熔解曲线单一峰视为阳性。
注意事项
分区操作：严格区分样本处理区、PCR准备区及扩增区，避免污染。
质控要求：
阳性质控品需出现扩增曲线，阴性质控品无信号。
重复冻融：试剂解冻后需混匀并离心，避免反复冻融影响性能。
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