产品基本信息
规格：50T（50次反应，20μL体系）
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：12个月。
用途：科研用途（不可用于临床诊断）。
产品名称 | 知母探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Anemarrhena asphodeloides Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4904 |
试剂盒组成
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 / qRT-PCR缓冲液 | 1 mL / 500 μL |
| 试剂二 | 超纯水 / 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL / 1 mL |
| 试剂三 | 引物-探针混合液 / 干粉 | 100 μL / 50T |
| 试剂四 | 阳性对照（1×10⁷~10⁸拷贝/μL） | 50 μL |
| 说明书 | 使用手册 | 1份 |
产品特点
高特异性：基于保守基因序列设计的引物与探针，避免交叉反应。
高灵敏度：检测限低至1000拷贝/反应，支持定性与定量分析。
操作便捷：一站式试剂盒，含预混液、引物及阳性对照，无需额外配制。
防污染设计：一管式RT-PCR技术（部分型号），减少操作误差。
实验操作流程
1. 标准曲线制备（定量分析适用）
用阳性对照按10倍梯度稀释（10⁶~10¹拷贝/μL），独立分区操作。
标记离心管，依次加入稀释液与模板，涡旋混匀后冰上暂存。
2. 样本DNA提取
建议设置阴性对照（NC）与阳性对照（PC），使用兼容的DNA提取试剂盒。
3. qPCR反应体系（20μL）
程序设置：
逆转录：50℃ 10 min（若含RT步骤）。
预变性：95℃ 10 min。
扩增循环（40次）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM信号）。
4. 数据分析
定量：以Ct值与标准曲线计算样本浓度。
定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性，39~40需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，避免交叉污染。
试剂处理：使用前充分融化混匀，短暂离心；反应液避光保存。
污染控制：
使用一次性耗材及专用工作服。
实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
运输与存储：低温避光运输，长期保存需-70℃，避免反复冻融。
局限性说明
检测结果受样本质量、提取方法、运输条件影响。
基因突变或操作污染可能导致假阴性/假阳性结果，需结合其他检测方法验证。
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