小鼠细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 小鼠细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | Murine Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4799 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术,专用于检测小鼠细胞(如NS0骨髓瘤细胞或Mus musculus来源细胞)基因组DNA残留,适用于科研用途,不可用于临床诊断。试剂盒包含优化引物、探针及阳性对照,可实现高灵敏度(检测下限达10^1拷贝/μL)和高特异性,避免与其他微生物DNA交叉反应。
产品规格
检测方法:探针法荧光定量PCR(50次反应,20μL体系)
存储条件:-20℃避光保存
保质期:未开封12个月
主要成分:
探针法qPCR缓冲液(500μL)
qPCR酶混合液(50μL)
荧光PCR专用模板稀释液(1mL)
PCR引物-探针干粉(50T)
阳性对照(10^7拷贝/μL,50μL)
操作步骤
1. 标准曲线制备(10倍梯度稀释)
标记6管,分别加入45μL稀释液,依次用阳性对照稀释至10^6~10^1拷贝/μL,冰上保存。
注意:操作需在独立区域,避免污染。
2. 样品DNA制备
建议设置N+2个样本(含阳性/阴性对照),使用兼容的核酸纯化方法提取DNA。
3. qPCR反应设置(定量分析)
标记N+9管:N+2样本管、6标准曲线管、1阴性对照管。
反应程序:
50℃ 10min(逆转录);
95℃ 10min(预变性);
40循环:95℃ 15sec → 60℃ 60sec(采集FAM信号)。
4. 数据分析
定量:以Ct值与标准曲线log值计算浓度。
定性:Ct≤39为阳性,≥40为阴性;39-40需复测。
注意事项
分区操作:样本处理、试剂配制、加样需分区域,避免交叉污染。
质量控制:阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤39且扩增曲线正常。
样本保存:短期-20℃,长期-70℃(≤6个月);运输需2-8℃冰袋。
安全规范:实验后使用10%次氯酸或75%酒精消毒台面,废弃物按生物危害处理。
局限性
结果可能受样本质量、提取方法、运输条件影响。
基因突变或试剂保存不当可能导致假阴性/假阳性。
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关键字: 小鼠细胞基因组DNA残留;探针法荧光定量;PCR试剂盒;