猪细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 猪细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | Porcine Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4798 |
产品基本信息
规格：50次反应（20μL体系）
存储条件：-20℃避光保存
保质期：未开封状态下12个月
用途：科研用途，不可用于临床诊断
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，试剂盒包含预混优化组分。
高灵敏度与特异性：引物针对猪基因组DNA高度保守区设计，避免交叉反应。
双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，区分假阴性结果。
操作流程
标准曲线制备（以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例）
标记稀释管：准备6支离心管，编号7至2。
稀释阳性对照：
7号管加入45μL稀释液及5μL试剂盒提供的阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得到10⁷拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每次更换枪头避免污染。
样本DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA，并设置阳性/阴性对照（N+2个样本）。
qPCR反应设置（20μL体系）
定量分析：需准备N+9个反应管（N+2样本、6标准曲线、1阴性对照）。
反应程序：
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环）
荧光信号采集：退火步骤完成后进行。
注意事项
防污染措施：标准品稀释需在独立区域操作，使用带滤芯枪头。
质量控制：建议每次实验均包含标准曲线与阴阳性对照。
数据判读：定量结果需基于标准曲线计算拷贝数；定性检测可仅使用单一标准品（如10⁴拷贝/μL）。
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