猪细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 猪细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | Porcine Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4798 |
产品基本信息
规格:50次反应(20μL体系)
存储条件:-20℃避光保存
保质期:未开封状态下12个月
用途:科研用途,不可用于临床诊断
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板,试剂盒包含预混优化组分。
高灵敏度与特异性:引物针对猪基因组DNA高度保守区设计,避免交叉反应。
双重检测功能:支持定性与定量分析,定量线性范围达5个数量级。
内置对照:提供无传染性DNA片段作为阳性对照,区分假阴性结果。
操作流程
标准曲线制备(以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例)
标记稀释管:准备6支离心管,编号7至2。
稀释阳性对照:
7号管加入45μL稀释液及5μL试剂盒提供的阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀,得到10⁷拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管(10²拷贝/μL),每次更换枪头避免污染。
样本DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA,并设置阳性/阴性对照(N+2个样本)。
qPCR反应设置(20μL体系)
定量分析:需准备N+9个反应管(N+2样本、6标准曲线、1阴性对照)。
反应程序:
预变性:95℃ 3分钟
循环阶段:95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(40循环)
荧光信号采集:退火步骤完成后进行。
注意事项
防污染措施:标准品稀释需在独立区域操作,使用带滤芯枪头。
质量控制:建议每次实验均包含标准曲线与阴阳性对照。
数据判读:定量结果需基于标准曲线计算拷贝数;定性检测可仅使用单一标准品(如10⁴拷贝/μL)。
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关键字: 猪细胞基因组DNA残留;探针法荧光定量;PCR试剂盒;
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