产品介绍:
N2 亚型流感病毒核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测甲型流感病毒 N2 亚型(AIV-N2)核酸的分子诊断工具。该试剂盒主要基于实时荧光 RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)技术,能够特异性识别病毒的神经氨酸酶(NA)基因。
产品名称 | N2 亚型流感病毒核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3050 |
检测原理
该试剂盒通常采用双重荧光 RT-PCR技术,旨在提高检测的准确性和可靠性:
逆转录 (RT): 将样本中提取的病毒 RNA 逆转录成互补的 DNA (cDNA)。
双重扩增系统:
FAM 通道 (N2 检测): 使用特异性引物和探针(TaqMan-MGB)扩增 N2 亚型的 NA 基因,用于确认 N2 亚型。
HEX/JOE 通道 (通用型内参): 扩增甲型流感病毒的 M 基因(Matrix gene),用于确认样本中是否存在甲型流感病毒核酸(无论何种亚型)。
内标 (IC): 部分高端试剂盒会在反应体系中加入外源性内标(通常标记为 ROX),用于监控核酸提取和扩增过程,防止假阴性。
结果判读逻辑:
N2 亚型阳性: FAM 通道和 HEX 通道均出现特异性扩增曲线(表明是甲型流感且为 N2 亚型)。
其他甲型流感阳性: 仅 HEX 通道出现扩增(表明是甲型流感,但不是 N2 亚型)。
阴性: 两个通道均无扩增(且内标正常)。
�� 典型性能参数
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 N2-NA 基因 / M 基因 双重检测,确保分型准确
检测方法 荧光 RT-PCR (探针法) TaqMan 探针,特异性高
检测限 1×10³ 拷贝/mL 最低可检测浓度
特异性 高 不与 H1、H3、H5、H7 等其他亚型及常见呼吸道病原体交叉反应
检测时间 约 1.5 - 2 小时 视 PCR 仪程序而定
储存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存 有效期通常为 6-12 个月
�� 样本类型
禽类样本: 泄殖腔拭子、咽喉拭子(这是 N2 亚型的主要检测样本,常见于禽类)。
环境样本: 活禽市场环境涂抹物、污水等。
临床样本: 咽拭子、痰液、肺泡灌洗液(用于疑似人感染 N2 病例的排查,通常与 HxN2 组合感染相关)。
�� 操作流程简述
样本采集与保存: 使用无菌采样拭子采集样本,放入病毒采样液中,4℃运送,长期保存需-70℃。
病毒 RNA 提取: 使用配套的病毒 RNA 提取试剂盒(如磁珠法或柱提法)提取核酸。
配置反应体系: 将提取的 RNA、PCR 反应液(含引物、探针、酶)按比例混合。
上机检测: 将反应管放入实时荧光 PCR 仪(如 ABI 7500、LightCycler 480 等),设置好荧光通道(FAM 和 HEX)。
结果分析: 根据扩增曲线的 Ct 值(通常阈值设为 35-40)进行判读。
⚠️ 注意事项
生物安全: N2 亚型主要存在于禽类中,属于潜在的感染性生物因子。操作应在生物安全二级(BSL-2)实验室进行,涉及病毒培养需在更高防护级别实验室进行。
防污染: PCR 检测极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、PCR 扩增区),防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
试剂保存: 试剂盒中的酶和探针通常需在 -20℃ 避光保存,避免反复冻融。
临床意义: N2 亚型通常与其他 HA 亚型(如 H3、H4、H5、H7 等)组合形成 HxN2 病毒。该试剂盒主要用于禽流感的分型鉴定、流行病学调查以及跨种属传播风险评估。检测结果需结合流行病学史和临床症状综合判断。
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检测性能优势:
高灵敏度
最低检出限达100-500拷贝/mL,显著高于传统培养法(需10-10 CFU/mL)。
强特异性
采用荧光探针法,避免与其他链球菌交叉反应,特异性≥99%。
二、临床应用价值
快速出结果
全程检测时间1-2小时(含核酸提取),较培养法(24-48小时)效率提升显著。
自动化兼容
支持批量样本处理,可搭配全自动核酸提取仪,适合大规模筛查。
三、操作便捷性
样本类型灵活
适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本,采集后可直接检测。
操作简化
部分试剂盒采用一体化设计(如卡尤迪产品),减少人工操作步骤
关键字: N2 ;亚型流感病毒;检测试剂盒;
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