产品介绍：
登革病毒Ⅲ型（Dengue Virus Type 3，简称 DENV-3）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测登革病毒Ⅲ型核酸的分子诊断工具。登革病毒是引起登革热（Dengue Fever）的病原体，根据抗原性不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个血清型，不同型别感染后的临床表现和重症风险可能有所不同，因此分型检测对于临床诊疗和流行病学监测具有重要意义。
产品名称 | 登革病毒Ⅲ型核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3200 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
检测原理与技术
目前市面上的试剂盒主要基于 实时荧光定量 RT-PCR 技术（qRT-PCR），通常采用 TaqMan 探针法。
技术原理： 试剂盒针对登革病毒Ⅲ型基因组 RNA 中的高度保守区域（如 E 基因 或 NS1/NS5 基因）设计特异性的引物和探针。
反应机制： 在 PCR 扩增过程中，随着目标序列的指数级扩增，荧光探针被酶切，释放出荧光信号（通常标记为 FAM 或 VIC 荧光素），仪器实时监测信号变化。
分型检测策略：
通用型+分型型： 实验室通常先使用登革病毒通用型检测试剂盒进行初筛，若结果为阳性，再使用登革病毒Ⅲ型核酸检测试剂盒进行确认和分型。
四重/多重检测试剂盒： 市场上也有四重核酸检测试剂盒，可以在一个反应管中同时检测并区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个血清型，大大提高了检测效率。
�� 核心性能指标
根据公开的文献及产品信息，该类试剂盒通常具备以下性能：
指标 参数 说明
检测靶标 E 基因 / NS1 基因 病毒基因组保守区域
检测限 1×10³ copies/mL 灵敏度高，可检测低病毒载量样本
特异性 100% 与乙脑病毒、寨卡病毒等黄病毒属其他成员无交叉反应
检测时间 约 1.5 小时 含反转录和扩增步骤
�� 典型操作流程
样本采集： 采集患者急性期（发病5天内）的血清、血浆或全血样本。
核酸提取： 使用试剂盒配套的病毒 RNA 提取试剂（通常为磁珠法）提取样本中的病毒 RNA。
反转录与扩增： 将提取的 RNA 模板加入预混好的 RT-PCR 反应液中，上机运行程序（包括逆转录、预变性及40-45个扩增循环）。
结果判读：
阳性： FAM/VIC 通道出现典型的 S 型扩增曲线，且 Ct 值 ≤ 37-38（具体视说明书而定）。
阴性： 无扩增曲线，或 Ct 值 > 40。
临床意义： 早期确诊和分型有助于判断病情严重程度（二次感染不同血清型易导致重症登革热/登革出血热）及指导临床治疗。
⚠️ 注意事项
窗口期限制： 登革病毒感染早期（发病1-5天）血液中病毒载量高，适合核酸检测。发病超过5天后，病毒载量下降，建议结合 IgM/IgG 抗体检测 或 NS1 抗原检测 进行综合判断。
用途限制： 部分产品仅用于科研或卫生监督，严禁用于临床医疗诊断，除非其已获得医疗器械注册证。
防污染： 操作必须严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染导致假阳性。
公司正在出售的产品：
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操作步骤：
整个流程遵循“样本处理 → 试剂配制 → 加样 → 上机检测 → 结果分析”的逻辑，核心是防污染和精准操作。
1. 样本处理 (核酸提取)
样本：鼻咽拭子、咽拭子或痰液样本。
裂解：将拭子浸入裂解液，充分混匀后室温静置10分钟。
提取：采用磁珠法或离心柱法提取总RNA，严格按照试剂盒说明书操作。
保存：洗脱后的RNA应立即使用或分装保存于-80℃。
2. 试剂配制与加样
反应体系准备：在试剂准备区配制Master Mix。根据待检测样本数计算总体积，通常按样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照的原则来配制。
推荐体系：例如，使用20μL体系的试剂盒，可包含qPCR预混液16μL、引物探针混合液4μL（具体体积请以实际说明书为准）。
分装：将配好的反应体系分装至PCR反应管中（如20μL/管）。
加样：在样本处理区，分别向反应管中加入5μL的模板RNA（样本、阳性质控、阴性质控）。盖紧管盖，短暂离心，避免污染和气泡。
3. 上机检测
运行程序：将反应管放入荧光定量PCR仪，运行预设程序。典型程序包括：
逆转录：50℃，15分钟（将RNA逆转录为cDNA）。
预变性：95℃，10分钟（激活Hot-Start Taq酶）。
扩增循环：通常为40个循环，每个循环包括变性（95℃，15秒） 和 退火/延伸（60℃，45秒），仪器在退火/延伸步骤同时采集荧光信号。
信号监测：仪器实时监测荧光信号变化，生成扩增曲线。
4. 结果分析与判定
Ct值：仪器根据荧光曲线自动计算阈值循环数（Ct值）。
结果判定：
阳性：样本Ct值 ≤ 37（具体阈值请以试剂盒说明书为准），且扩增曲线呈典型"S"型。
阴性：样本无Ct值或Ct值 > 40。
无效：阳性对照无Ct值或Ct值 > 35，或阴性对照有Ct值，需重新检测。
关键字： 登革病毒;Ⅲ型;检测试剂盒;
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