极小棒杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Corynebacterium minutissimum Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4502
检测原理
基于染料法荧光定量PCR技术，通过特异性引物扩增极小棒杆菌保守基因区域，SYBR Green染料嵌入双链DNA后释放荧光信号，实时监测扩增进程。
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。
高特异性：引物设计针对极小棒杆菌保守序列，避免交叉反应。
闭管操作：一管式反应体系降低交叉污染风险。
内置对照：提供阳性对照以排除假阴性结果。
操作流程
1. 实验前准备
分区操作：严格区分试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区，各区使用独立耗材（建议使用带滤芯吸头）。
样本处理：在生物安全柜中操作，保持0-4℃环境以避免核酸降解。
2. 反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR预混液 | 10 |
| 染料法qPCR引物混合液 | 2 |
| 模板DNA | 6 |
| 超纯水 | 2 |
注：
阳性对照需单独配制，避免污染其他组分。
若使用ABI 7500/7700/7900仪器，需添加2μL 10×ROX染料；其他仪器以超纯水替代。
3. PCR扩增程序
预变性：95℃ 3分钟（1个循环）。
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40个循环，荧光信号采集）。
注意事项
质量控制：每批次实验需设置阴性对照（超纯水）和阳性对照。
试剂处理：使用前充分融化混匀并瞬时离心，避免反复冻融。
污染防控：操作阳性对照时需在独立区域进行，实验后对工作台进行紫外线消毒。
适用范围：本试剂盒仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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