创伤弧菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Vibrio vulnificus Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4521
检测原理
基于实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物和荧光探针靶向创伤弧菌的保守基因序列。扩增过程中，探针与目的基因结合后被Taq酶水解，释放荧光信号，仪器通过FAM通道检测荧光强度变化，生成实时扩增曲线，实现定性检测。
试剂盒组分
预混液（含引物、探针、dNTPs、酶等）
阴性对照
阳性对照
其他必要反应试剂
操作步骤
样本准备：提取待测样本DNA。
反应体系配制：
取PCR反应管，每管加入20 μL预混液（使用前涡旋混匀并离心）。
分别加入5 μL阴性对照、待测样本DNA或阳性对照，总体积25 μL。
PCR扩增程序：
阶段1：95℃ 30秒（预变性）；
阶段2：95℃ 5秒 → 60℃ 30秒（信号采集），共40个循环。
信号采集：
荧光通道选择FAM，淬灭基团和染料校正均设为“None”。
结果判读
通过仪器软件自动分析扩增曲线及Ct值，阈值和基线可根据仪器噪声调整。
阳性样本显示典型的S型扩增曲线，阴性样本无扩增信号。
性能参数
灵敏度：最低检测限为100 CFU/测试。
特异性：对创伤弧菌目标基因高度特异，无交叉反应。
储存及稳定性
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：12个月。
注意事项
操作需符合生物安全规范，避免污染。
试剂解冻后应充分混匀，离心去除气泡。
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