本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理设计检测体系,酶标板预先包被大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)特异性捕获抗体。待测样本、标准品中的GIP抗原会与固相捕获抗体特异性结合,经孵育、洗板去除杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的GIP检测抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体夹心结构。底物经酶催化后产生显色反应,显色深浅对应样本中GIP的含量高低,终止反应后检测吸光度,结合标准曲线即可定量分析大鼠样本中GIP的浓度水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1293 |
英文名称 | GIP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度0.1pg/mL,可检出大鼠肠道、血清中微量GIP激素表达。
检测范围:0.4pg/mL - 80pg/mL,覆盖大鼠糖代谢、胰岛素抵抗、糖尿病模型的GIP浓度范围。
反应时间:标准反应时长120分钟,37℃恒温孵育,适配高通量样本检测。
保存条件:试剂盒2 - 8℃冷藏,严禁冷冻,冷冻会导致蛋白抗体变性失活。
有效期:原装密封有效期12个月,开封后试剂避光保存,2周内使用最佳。
特异性:特异性结合大鼠GIP多肽,与GLP - 1、胰岛素等肠道降糖激素无交叉反应。
重复性:板内CV≤4.5%,板间CV≤6.5%,检测精度高,数据稳定性好。
注意事项:血清样本需空腹采集,避免食物干扰激素水平;样本避免反复冻融,防止多肽降解;显色反应需严格控制时间,避免过深或过浅。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
1. 试剂室温复温 28min,配制洗涤液;大鼠血浆样本融化后离心取上清,避免反复冻融。
2. 酶标板标记各类孔位,标准品孔加梯度 GIP 标准品 50μL,样本孔加待测血浆 50μL,空白孔空置。
3. 除空白孔外每孔加入酶标记二抗工作液 100μL,密封封板。
4. 37℃避光孵育 55min,完成一步法抗原 - 抗体 - 酶标物结合。
5. 弃液洗板,每孔洗涤液浸泡 30s,重复洗板 4 次,彻底拍干残留液体。
6. 加入显色底物 A、B 各 50μL,震荡混匀,37℃避光显色 16min。
7. 加终止液 50μL 混匀,450nm 测定 OD 值,对照标准曲线计算 GIP 浓度。
关键字: 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽;GIP;ELISA试剂盒;
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