人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板预先包被人GRP特异性抗体，加入标准品与待测样本后，样本内胃泌素释放多肽与固相抗体特异性结合，洗板去除游离物质，加入HRP标记二抗形成稳定免疫复合物，再次洗板后进行底物显色反应，显色深浅与GRP含量正相关，通过吸光度检测和标准曲线分析实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒

英文名称：GRP   Elisa Kit
货号：Y-E364

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.05pg/mL

检测范围：0.1～9pg/mL

反应时间：室温振荡孵育 92min，二抗 59min，显色 22min

保存条件：试剂盒 2～8℃，底物液严禁光照照射

显色系统：HRP 催化 TMB 显色，稀硫酸终止反应

检测波长：仅 450nm 读取 OD 数值

标准曲线绘制：非线性四参数拟合，空白孔用于基线校正

注意事项：样本采血后尽快分离血清，多肽类物质极易降解失活
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温放置 33min，GRP 捕获抗体包被板去除孔内液体，洗板 1 次后拍干微孔。

规划孔位：空白孔、梯度标准品孔、胃液稀释样本孔；标准品孔加入 GRP 标准品 60μL，样本孔加入预处理胃液样本 60μL，空白孔加稀释液。

每孔加入 HRP 标记二抗 60μL，封板膜封闭，37℃湿盒孵育 72min。

掀开封板倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 40s 弃除，洗板 6 次，倒置拍干微孔。

配制显色工作液每孔加 100μL，37℃避光显色 16min。

每孔加注终止液 50μL，轻摇板体终止底物反应。

450nm 波长读数，拟合标准曲线测定 GRP 多肽含量。
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