一、核心属性
二、光学特性
TJ-AF-555 发出明亮的橙红色荧光,其光谱参数如下:
三、核心特点与优势
1、高亮度与高稳定性:标记后的偶联物比光谱相似的染料(如Cy3、TAMRA)更明亮、光2、稳定性更强。其四磺酸结构使其具有极强的水溶性,能降低蛋白聚集和荧光淬灭的风险。
3、优异的pH稳定性:在pH 4至10的广泛范围内,荧光信号保持稳定。
4、高标记效率:可以在蛋白质上实现高摩尔比标记而不会发生显著的自淬灭,从而形成更明亮的偶联物。
四、主要应用
TJ-AF-555是生命科学研究的通用工具,应用极为广泛:
1、免疫检测:用于免疫荧光 (IF/ICC)、流式细胞术 (FACS) 和荧光Western Blot。
2、细胞成像:适用于共聚焦显微镜及超分辨率显微镜(如STED)。
3、核酸研究:用于标记寡核苷酸探针,进行荧光原位杂交 (FISH) 和实时荧光检测。
4、多重荧光实验:常与TJ-AF-488、TJ-AF-647等染料组合使用,实现多色成像。
5、FRET实验:可作为荧光共振能量转移 (FRET) 体系中的供体或受体。
6、细胞骨架标记:其鬼笔环肽(Phalloidin) 衍生物可用于特异性标记F-肌动蛋白。
五、常见衍生物
为方便标记不同生物分子,TJ-AF-555被制成多种活性衍生物:
六、使用与储存建议
1、储存条件:作为粉末,应在 -20°C 下避光、干燥保存。
2、标记反应(以NHS酯为例):
(1)溶剂:通常溶于无水DMF或DMSO。
(2)缓冲液:在0.1–0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 8.3) 中室温反应1小时。
(3)蛋白浓度:建议蛋白浓度至少为2 mg/mL以获得最佳标记效果。
3、纯化:标记后的抗体等偶联物可通过凝胶过滤层析(如Sephadex™ G-25)进行纯化。
4、注意事项:所有操作需严格避光。NHS酯衍生物对水敏感,应避免接触水分。
关键字: 新型荧光染料;
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