一、核心属性
属性 | 详细信息 |
产品名称 | TJ-AF-568 |
染料类别 | 磺化罗丹明(Sulfonated Rhodamine) 类染料 |
分子量 | NHS酯形式约 791.8 Da;酰肼形式约 730.74 Da |
外观 | 通常为固体或粉末 |
光谱相似染料 | 罗丹明红(Rhodamine Red) |
二、光学特性
TJ-AF-568 发出明亮的橙红色荧光,其激发光谱与568 nm的氩-氪混合气体激光器谱线完美匹配。
参数 | 数值 | 备注 |
最大激发波长 (Ex) | ~578 nm | 部分资料显示为579 nm或577 nm |
最大发射波长 (Em) | ~603 nm | 发射峰位于橙红区 |
摩尔消光系数 (ε) | ~88,000 - 91,000 M⁻¹cm⁻¹ | 表明其光吸收能力很强 |
荧光量子产率 (Φ) | 0.69 | 在PBS缓冲液(pH 7.2)中测得 |
荧光寿命 (τ) | 3.6 ns | 在水中测得(22°C) |
三、核心特点与优势
1、高亮度与高光稳定性:具有高量子产率(0.69)和优异的光稳定性。其偶联物比其他光谱相似荧光染料的偶联物更明亮、光稳定性更强。长时间曝光不易光漂白。
2、优异的水溶性:作为磺化罗丹明衍生物,分子中的磺酸基团使其高度亲水,在水相环境中性能出色。
3、宽的pH稳定性:在pH 4至10的广泛范围内,荧光信号保持稳定。
4、与RFP滤光片组匹配良好:其光谱与红色荧光蛋白(RFP)的滤光片组兼容。
5、高标记效率:可以在蛋白质上实现高摩尔比标记而不发生显著的自淬灭。
四、主要应用领域
TJ-AF-568是生命科学研究的通用工具,应用极为广泛:
1、免疫检测:用于免疫荧光 (IF/ICC)、免疫组化 (IHC) 和流式细胞术 (FACS)。
2、细胞成像:适用于共聚焦显微镜及超分辨率显微镜(如dSTORM、SIM、STED)。
3、细胞示踪与标记:酰肼衍生物可作为细胞示踪剂,通过显微注射等方式载入细胞。
4、核酸研究:用于标记寡核苷酸探针,进行荧光原位杂交 (FISH) 和实时PCR。
5、活细胞成像:良好的光稳定性使其适合长时间的活细胞观察,跟踪细胞动态过程。
6、多重荧光实验:在多重荧光实验中可与绿光染料(如TJ-AF-488)同时使用而无明显信号干扰。
五、常见活性衍生物
为方便标记不同生物分子,TJ-AF-568被制成多种活性衍生物:
衍生物类型 | 主要用途 |
NHS酯 (NHS Ester) | 最常用。用于标记蛋白质、抗体、胺修饰的寡核苷酸等分子中的氨基 |
马来酰亚胺 (Maleimide) | 特异性标记含半胱氨酸的蛋白质或肽段,生成稳定的硫醚键 |
酰肼 (Hydrazide) | 标记多糖或糖蛋白中的醛/酮;也可用作细胞示踪剂 |
羧酸 (Carboxylic Acid) | 用作参比标准品或化学合成前体 |
六、使用与储存建议
1、储存条件:作为粉末,应在 -20°C 下避光、干燥保存。
2、运输条件:通常在冰袋条件下运输。
3、标记反应(以NHS酯为例):
(1)溶剂:通常溶于无水DMF或DMSO。
(2)缓冲液:在0.1–0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 8.3) 中室温反应1小时。
(3)蛋白浓度:建议蛋白浓度至少为2 mg/mL以获得最佳标记效果。
(4)纯化:标记后的抗体等偶联物可通过凝胶过滤层析(如Sephadex™ G-25)进行纯化。
关键字： 新型荧光染料;
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