一、核心属性
二、光学特性
TJ-AF-514发出明亮的绿色荧光,其光谱参数如下:
三、核心特点与优势
1、高亮度与高稳定性:具有高量子产率和优异的光稳定性,其偶联物比光谱相似的荧光染料偶联物更明亮、光稳定性更强。
2、优异的水溶性:在水相环境中性能出色,能降低蛋白聚集的风险。
3、宽的pH稳定性:在pH 4至10的广泛范围内,荧光信号保持稳定,适用于多种实验条件。
4、光谱分辨清晰:其光谱与TJ-AF-488等染料能够清晰区分,适合多色荧光实验。
5、高标记效率:可以在蛋白质上实现高摩尔比标记而不发生显著的自淬灭。
四、主要应用
TJ-AF-514是生命科学研究的通用工具,应用广泛:
1、荧光显微镜:包括共聚焦显微镜、超分辨率显微镜及活细胞成像。
2、流式细胞术 (FACS):用于稳定信号的生成。
3、免疫检测:用于免疫荧光 (IF/ICC) 标记抗体。
4、多重荧光实验:常与其他荧光染料(如TJ-AF-488、TJ-AF-568、TJ-AF-647)组合使用。
5、核酸研究:用于标记寡核苷酸探针,进行荧光原位杂交 (FISH)。
6、蛋白标记:用于标记抗体、酶、受体及其他蛋白分子。
五、常见衍生物
为方便标记不同生物分子,TJ-AF-514被制成多种活性衍生物:
六、使用与储存建议
1、储存条件:作为粉末,应在 -20°C 下避光、干燥保存。
2、标记反应(以NHS酯为例):
(1)溶剂:通常溶于高质量无水DMF或DMSO。
(2)缓冲液:在0.1–0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 8.3) 中室温反应1小时。
(3)蛋白浓度:建议蛋白浓度至少为2 mg/mL以获得最佳标记效果。
(4)纯化:标记后的抗体等偶联物可通过凝胶过滤层析(如Sephadex™ G-25)进行纯化。
3、注意事项:
(1)所有操作需严格避光。
(2)NHS酯衍生物对水敏感,应避免长时间暴露在水溶液中。
(3)含伯氨基的缓冲液(如Tris、甘氨酸)会抑制NHS酯反应。
关键字: 新型荧光染料;
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