TRzol（总 RNA 提取试剂）

基本信息‌：

中文名称‌：TRIzol试剂（总RNA提取试剂）

‌英文名称‌：TRIzol™ Reagent

‌作用原理‌：通过变性剂破坏细胞结构，抑制RNase活性，利用氯仿相分离实现RNA选择性回收

‌适用样本‌：人、动物、植物、酵母、细菌等多种来源的组织与细胞

‌提取时长‌：约1小时可完成

‌储存条件‌：4°C避光保存，避免冻结

核心优势‌：

✅ 可同时提取RNA、DNA和蛋白质（分步沉淀）

✅ 抑制RNase能力强，保障RNA完整性

✅ 操作简便，适合高通量处理

✅ 提取的RNA无蛋白质和DNA污染，可直接用于RT-PCR、qPCR、测序等下游实验

公司正在出售的产品：

‌标准操作流程‌：

1. ‌样本裂解‌

‌组织样本‌：取50–100 mg新鲜或冻存组织，加入1 mL TRIzol，液氮研磨后充分匀浆。

‌贴壁细胞‌：直接在培养皿中加入TRIzol（每10 cm²加1 mL），吹打裂解。

‌悬浮细胞‌：离心收集5–10×10⁶细胞，弃上清后加入1 mL TRIzol重悬。

室温静置5–10分钟，使核酸-蛋白复合物充分解离。

2. ‌相分离‌

每1 mL TRIzol加入0.2 mL氯仿，剧烈振荡15秒，室温静置2–3分钟。

4°C、12,000 × g离心15分钟，形成三层：

‌上层水相‌（无色）：含RNA

‌中间层‌（白色）：含DNA

‌下层有机相‌（粉红）：含蛋白质

小心吸取上层水相至新离心管，‌切勿触碰中间层‌。

3. ‌RNA沉淀‌

加入等体积异丙醇，轻柔混匀，室温静置10–15分钟。

4°C、12,000 × g离心10分钟，可见胶状RNA沉淀。

弃上清，用75%乙醇（预冷）洗涤沉淀一次，12,000 × g离心5分钟。

4. ‌RNA溶解‌

短暂离心后吸尽乙醇，室温晾干3–5分钟（‌不可完全干燥‌，否则难溶）。

加入30–100 μL无RNase水溶解RNA，可于55–60°C孵育10分钟助溶。

分装后-80°C保存，避免反复冻融。