基本信息
中文名称:RNA快速提取试剂盒
货号:P-PR1479
规格:50T、100T
英文名称:Rapid RNA Extraction Kit
作用机制:采用裂解液迅速裂解细胞或组织,释放RNA,再通过吸附柱或磁珠特异性结合RNA,去除蛋白质、DNA、多糖等杂质,最后用洗脱液获得纯净的RNA,整个流程耗时短。
适用样本:培养细胞、新鲜或冻存组织、血液、植物组织等。
产品概述
RNA快速提取试剂盒专为快速、高效提取各类样本中的总RNA设计,采用独特裂解体系与硅胶膜纯化技术,可在短时间内获得高纯度、完整性好的RNA,满足反转录PCR、荧光定量PCR、基因芯片、Northern杂交等多种分子生物学实验需求。
试剂盒组成
(以50次提取装为例)
组分 规格
裂解液A 100mL
裂解液B 50mL
吸附柱(带收集管) 50套
通用洗柱液 100mL
RNA洗脱液 20mL
使用说明书 1份
产品特点
极速提取:针对不同样本类型,最快可在5-25分钟内完成提取流程,大幅提升实验效率。
高纯度高完整性:提取的RNA OD₂₆₀/OD₂₈₀比值达1.9~2.2,无DNA残留,完整性良好,可直接用于各类下游实验。
广谱适用性:适用于动物组织、植物材料、培养细胞、微生物、全血、病毒液等多种样本类型,尤其针对多糖/多酚类复杂植物样本优化,解决常规试剂盒提取失败难题。
安全环保:无需酚/氯仿等有毒有机试剂抽提,操作过程更安全,减少环境污染。
灵活便捷:支持批量样本处理,也可针对微量样本优化提取流程,适配不同实验需求。
性能参数
RNA产量:每100mg动物组织/200mg植物组织可获得10-50μg总RNA(因样本类型差异有所波动)。
保存期限:试剂盒常温(15-25℃)干燥避光保存,有效期12个月;提取的RNA在-80℃可长期保存。
适用实验:RT-PCR、荧光定量PCR、Northern杂交、mRNA纯化、体外翻译、基因芯片、二代测序等。
操作步骤
动物组织/培养细胞提取流程
样本处理
培养细胞:离心收集1×10⁶-1×10⁷个细胞,弃上清,用1mL冰PBS重悬后再次离心,彻底去除上清。
动物组织:取10-100mg新鲜或液氮冻存组织,加入1mL裂解液A,用匀浆器匀浆或液氮研磨至无明显块状。
裂解:向样本中加入1mL裂解液A,剧烈涡旋振荡30秒,室温放置5分钟,确保样本充分裂解。
分离上清:将裂解液转移至1.5mL离心管,12000rpm室温离心5分钟,吸取上清液转移至新离心管。
结合吸附柱:向上清液中加入等体积裂解液B,轻轻颠倒混匀,将混合液分次加入吸附柱,12000rpm室温离心30秒,弃收集管中废液。
洗涤:向吸附柱中加入500μL通用洗柱液,12000rpm室温离心30秒,弃废液;重复此步骤1次。
干燥吸附柱:将吸附柱放回收集管,12000rpm室温离心2分钟,彻底去除残留洗柱液。
洗脱RNA:将吸附柱放入新的1.5mL离心管,向吸附膜中央加入30-50μL RNA洗脱液(可提前预热至65℃),室温放置2分钟,12000rpm室温离心2分钟,收集洗脱液即为纯化的RNA。
植物组织(含多糖/多酚类)提取流程
样本处理:取50-200mg新鲜或液氮冻存植物组织,加入1mL裂解液A,液氮研磨成细粉后转移至离心管,剧烈涡旋振荡30秒。
裂解与除杂:室温放置5分钟,12000rpm室温离心10分钟,吸取上清液转移至新离心管(避免吸取沉淀)。
基因组DNA清除:向上清液中加入0.5倍体积的无水乙醇,轻轻混匀后加入基因组DNA清除柱,12000rpm室温离心30秒,收集穿透液。
RNA结合:向穿透液中加入0.5倍体积的无水乙醇,轻轻混匀后加入RNA吸附柱,12000rpm室温离心30秒,弃废液。
洗涤:向吸附柱中加入500μL通用洗柱液,12000rpm室温离心30秒,弃废液;重复此步骤1次。
干燥与洗脱:同动物组织提取流程步骤6-7,洗脱获得纯化RNA。
全血样本提取流程
白细胞分离:取2-3mL抗凝全血,缓慢加入到3mL淋巴细胞分离液上层,1500rpm室温离心15分钟,小心吸取中间白细胞层至新离心管。
细胞洗涤:加入等量生理盐水,4000rpm室温离心2分钟,弃上清,收集白细胞沉淀。
裂解与纯化:向白细胞沉淀中加入1mL裂解液A,涡旋振荡至彻底重悬,后续操作同动物组织提取流程步骤3-7。
储存条件
试剂盒需置于室温(15-25℃)、干燥、避光环境下密封保存,避免冻融;裂解液A若出现低温沉淀,使用前需65℃水浴溶解并摇匀。
注意事项
本产品仅用于科研或工业应用,不可用于临床诊断或治疗。
操作全程需在无RNase污染环境中进行,佩戴手套、口罩,使用无RNase的枪头、离心管等耗材。
若不慎接触皮肤或眼睛,需立即用大量清水冲洗,必要时寻求医疗帮助。
样本处理需尽量快速,避免RNA降解;提取的RNA建议立即用于实验或分装后-80℃冻存。
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