基本信息
产品名称 | 全血/血浆/血清总RNA提取试剂盒 | 货号 | P-PR1309 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:Total RNA Extraction Kit for Whole Blood/Plasma/Serum
作用机制:采用红细胞裂解液去除全血中的红细胞,保留白细胞;利用裂解液裂解白细胞或直接裂解血浆/血清中的游离RNA,结合硅胶膜或磁珠吸附技术纯化RNA;试剂盒含RNase抑制剂,可有效防止RNA降解。
适用样本:人或动物的全血、血浆、血清样本中的总RNA提取。
产品概述
全血/血浆/血清总RNA提取试剂盒是一款专门用于从全血、血浆或血清样本中提取总RNA的试剂盒。血液样本中含有大量的血红蛋白、RNase等物质,对RNA提取与保存造成较大挑战。该试剂盒针对血液样本的特性,优化了裂解与保护体系,可有效裂解细胞、释放RNA,同时抑制RNase的活性,去除血红蛋白等杂质对RNA的影响。它通常采用硅基质膜吸附技术,结合特殊的裂解液、结合缓冲液与洗涤缓冲液,能高效提取到纯度高、完整性好的总RNA。提取的RNA可用于多种分子生物学实验,如基因表达分析、病毒检测(如HIV、HCV等)、疾病标志物研究等。试剂盒操作流程简便,适用于临床样本的批量处理,为血液样本的RNA研究提供了可靠的技术支持。
产品特点
血液样本优化:针对血液中血红蛋白、RNase等干扰物优化试剂配方,有效去除杂质,保护RNA。
高产量提取:从1mL全血中可提取≥50μg总RNA,满足大量实验需求。
完整性好:提取的RNA完整性高,RIN值≥7.0,适用于RNA测序、芯片分析等高端实验。
操作简便:无需密度梯度离心,仅需20分钟即可完成提取,适合临床样本批量处理。
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液,按试剂瓶标注比例加入无水乙醇,充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样(杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤)加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液,充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟,期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇,充分搅拌混匀后,将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后,开启真空抽滤装置,将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内(注意不要抽干)
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ,静置2分钟后抽滤;再加入5mL洗涤液Ⅱ,静置2分钟后抽滤,重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱,放入收集管中,12000rpm常温离心3分钟,去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管,加入50-100μL预热的洗脱液,静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸,可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存:试剂盒应避光保存于2-8℃,有效期12个月;核酸富集因子避免反复冻融,使用后立即放回冰箱
水样预处理:高浊度或杂质过多的水样,需先经0.45μm滤膜过滤,避免堵塞吸附柱
操作规范:实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品,避免直接接触水样与试剂;若不慎接触皮肤或眼睛,立即用大量清水冲洗
试剂配制:洗涤液需现用现配,按比例加入无水乙醇后充分混匀,未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存:提取的核酸若长期保存,需置于-70℃环境,避免反复冻融;短期可在4℃保存24小时
器材要求:所有实验器材需为无RNA酶耗材,实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
关键字: 全血/血浆/血清总RNA提取试剂盒;Total RNA Extraction;
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