基本信息
产品名称 | 5min极速病毒RNA提取试剂盒 | 货号 | P-PR1308 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：5min Rapid Viral RNA Extraction Kit
作用机制：使用高浓度胍盐裂解液迅速灭活病毒并释放RNA，结合磁珠或硅胶膜快速吸附病毒RNA，通过洗涤液去除宿主核酸、蛋白质等杂质；整个提取过程仅需5分钟，可实现病毒RNA的高效回收与纯化。
适用样本：咽拭子、鼻拭子、痰液、血清、血浆等临床样本中的病毒RNA提取。
产品概述
5min极速病毒RNA提取试剂盒是一款专为快速提取病毒RNA设计的试剂盒，能在5分钟内完成病毒RNA的提取与纯化。它针对病毒颗粒的特性优化了裂解与吸附体系，可从血清、血浆、咽拭子、痰液、细胞培养上清等多种样本中高效提取病毒RNA。试剂盒采用硅基质膜吸附技术，结合特殊的裂解液能快速裂解病毒颗粒释放RNA，然后通过结合缓冲液使RNA吸附到吸附柱上，经洗涤去除蛋白质、DNA、杂质等，最后用洗脱缓冲液得到纯净的病毒RNA。该试剂盒提取的病毒RNA纯度高、完整性好，可直接用于病毒的RT-PCR检测、qPCR定量、基因测序等实验，为病毒的快速诊断与研究提供了有力工具，尤其适用于临床样本的快速检测场景。
产品特点
病毒特异性优化：针对病毒颗粒结构优化裂解液，快速释放病毒RNA，尤其适用于包膜病毒与非包膜病毒。
超高灵敏度：可从低至100copies/mL的病毒样本中提取RNA，满足病毒低载量检测需求。
去除抑制物：有效去除血液样本中的血红蛋白、痰液中的粘蛋白等PCR抑制物，确保后续qPCR反应顺利进行。
操作极简：无需蛋白酶K消化与异丙醇沉淀，仅需5分钟即可完成提取，适合临床样本快速检测。
操作步骤
样本处理：向1.5ml EP管中加入600μl miRNA提取试剂，再加入500μl血清或血浆样本，漩涡振荡30秒充分混匀
初步分离：13000rpm离心5分钟，将上清约1ml转移至新的2ml EP管中，加入1ml异丙醇，上下颠倒混合均匀
柱式吸附：将混合液分三次加入吸附柱（每次约700μl），13000rpm离心15秒，倒掉过柱液
洗涤纯化：
向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇，13000rpm离心15秒，倒掉过滤液
向吸附柱中加入500μl无水乙醇，13000rpm离心15秒，倒掉过滤液
干燥柱体：吸附柱13000rpm空离心2分钟，去除残留乙醇，室温放置2分钟使乙醇完全挥发
RNA洗脱：在吸附柱滤芯中央加入30μl RNase-Free TE缓冲液，室温静置2分钟，13000rpm离心2分钟，收集滤液即为提取的miRNA产物
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注意事项
样本处理：
血浆抗凝剂建议使用EDTA或柠檬酸钠，避免使用肝素（会抑制PCR检测）
样本应避免反复冻融，新鲜样本建议尽快处理
试剂使用：
miRNA提取试剂含有胍盐，具有强烈腐蚀性，操作时需佩戴防护眼镜、手套和口罩
自备试剂需确保无RNase污染，避免影响RNA完整性
实验操作：
所有操作需在无RNase环境中进行，使用RNase-Free的枪头和离心管
离心过程需确保离心管盖紧，避免液体渗漏
产物检测：
由于血清/血浆中miRNA含量极低，提取产物浓度通常在5ng/μl以下，难以用常规NanoDrop测量，建议直接取10μl进行下游反转录实验
为获得更可靠数据，推荐使用特异性和灵敏度更好的TaqMan探针法进行miRNA定量检测
产物保存：提取的miRNA产物可立即用于下游实验，或分装后置于-80℃长期保存，避免反复冻融
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