Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶

基本信息‌

‌英文名称‌：Ribonuclease R (RNase R) Exonuclease
作用机制：一种3'-5'核酸外切酶，可特异性降解线性RNA，包括mRNA、rRNA、tRNA等，但对环状RNA、带有3'突出末端的RNA或RNA-DNA杂合链中的RNA无作用，可用于去除样本中的线性RNA，富集环状RNA。 

适用样本：线性RNA样本，可用于环状RNA富集、RNA结构分析、RNA稳定性研究等实验。
产品概述
这是一种高度特异性的3'→5'核酸外切酶，能够高效降解几乎所有线性RNA分子，但对环状RNA、tRNA和rRNA的抗性较强。它可以识别并降解mRNA、非编码RNA等线性RNA，常用于研究RNA的稳定性、环状RNA的富集与鉴定、去除RNA样品中的线性RNA杂质等实验，是RNA研究领域的重要工具酶，为揭示RNA的功能与代谢机制提供支持。
产品特点
线性RNA专一性：高效降解所有线性RNA，对环状RNA无作用

强降解能力：可彻底降解mRNA、rRNA和tRNA等各种RNA分子

二级结构耐受：能降解带有复杂二级结构的RNA分子

环状RNA研究：是富集和研究环状RNA的关键工具酶
核心PCR试剂及使用方法

1. Taq DNA聚合酶

作用：催化DNA链的延伸，是PCR反应的核心酶

使用方法：

通常按0.5-2U/25μL体系添加，具体用量参照试剂说明书

酶对温度敏感，需在冰上操作，避免反复冻融

最后加入酶液，防止提前激活导致非特异性扩增

2. dNTP混合液

作用：提供DNA合成的原料（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）

使用方法：

终浓度一般为200μmol/L每种dNTP，总浓度800μmol/L

避免反复冻融，可分装成小体积储存

注意pH值，过酸或过碱会抑制聚合酶活性

3. PCR缓冲液

作用：提供酶促反应的适宜环境（pH、离子浓度）

使用方法：

通常为10×浓度，使用时稀释至1×终浓度

含Mg²+的缓冲液需注意Mg²+浓度，一般1.5-2.5mmol/L为最优范围

部分缓冲液含KCl、Tris-HCl等成分，无需额外添加

4. 引物（上游/下游）

作用：定位扩增区域，引导DNA合成起始

使用方法：

终浓度一般为0.1-1μmol/L，根据引物Tm值调整

引物需用TE缓冲液或无菌水溶解，浓度计算准确

避免引物降解，-20℃分装储存，避免反复冻融

5. 模板DNA

作用：提供扩增的原始DNA模板

使用方法：

模板浓度一般为1ng-1μg/25μL体系，根据模板类型调整

基因组DNA需充分纯化，避免蛋白、RNA等杂质污染

质粒DNA可适当减少用量，一般10-100ng即可

公司正在出售的产品

实验流程

反应体系配制：按1×工作浓度混合预混液、模板（10-100 ng）、引物（0.2-0.5 μM）及无核酸酶水。

PCR程序：

预变性：95℃ 30 sec

扩增循环（40×）：95℃ 5 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集）

熔解曲线分析：60-95℃梯度升温。

注意事项

避免反复冻融，推荐分装保存。

熔解曲线需呈现单一峰以确保扩增特异性。

若需绝对定量，建议配套标准品使用。