基本信息
中文名称：磁珠法组织核酸提取试剂盒（手自通用）
货号：P-PR1514
规格：50T、100T
英文名称：Magnetic Bead-based Tissue Nucleic Acid Extraction Kit (Manual/Auto-compatible)
作用机制：通过机械研磨或化学裂解的方式破碎组织细胞，释放核酸，磁珠结合核酸后，经过多轮洗涤去除组织中的蛋白质、多糖、脂类等杂质，可手动操作或适配自动化核酸提取仪。
适用样本：新鲜、冻存或石蜡包埋的动物组织、植物组织等。
产品概述
本试剂盒采用磁珠分离纯化技术，可从动物组织样本中高效提取基因组DNA或总RNA，提取产物纯度高、完整性好，可直接用于PCR、荧光定量PCR、基因测序、Southern杂交等下游分子生物学实验。同时支持手工操作与自动化提取仪适配，满足不同实验通量需求。
试剂盒组成
组分名称 规格 保存条件
裂解液 50ml 室温（15-25℃）
复合消化液 10ml 2-8℃冷藏
磁珠复合液 10ml 2-8℃冷藏
磁珠缓冲液 50ml 室温（15-25℃）
洗涤液 100ml 室温（15-25℃）
洗脱液 20ml 室温（15-25℃）
说明书 1份 -
自备材料与仪器
试剂：无水乙醇（分析纯）、蛋白酶K（20mg/ml）、RNase-Free水（提取RNA时使用）
仪器：
手工操作：磁力架、恒温水浴锅、移液器（10μl/100μl/1000μl）、低温离心机
自动化操作：适配型核酸提取仪、96孔深孔板
耗材：离心管（1.5ml/2ml）、吸头（无RNase/DNase）、一次性手套
实验前准备
1. 试剂配制
洗涤液工作液：向洗涤液中加入等体积的无水乙醇（如100ml洗涤液加100ml无水乙醇），充分混匀后室温保存，有效期12个月
蛋白酶K溶液：使用前将蛋白酶K（20mg/ml）稀释至1mg/ml备用（提取RNA时需使用RNase-Free水配制）
2. 样本预处理
新鲜动物组织：取50-100mg组织样本，用无菌PBS清洗去除血迹，剪碎后加入1ml裂解液，充分匀浆
冷冻组织：室温解冻后按新鲜组织处理，避免反复冻融
固定组织：需先进行脱蜡处理，具体方法参照相关实验指南
操作步骤
一、手工操作流程（以1.5ml离心管为例）
裂解：向预处理后的组织匀浆中加入20μl复合消化液和20μl 1mg/ml蛋白酶K，56℃水浴孵育30-60分钟，期间每隔15分钟颠倒混匀一次，直至组织完全裂解
结合：向裂解液中加入350μl异丙醇和20μl磁珠复合液，充分颠倒混匀，室温放置5分钟
磁分离：将离心管置于磁力架上，静置2-3分钟，待磁珠完全吸附后，小心吸弃上清（避免触碰磁珠）
洗涤：
加入500μl洗涤工作液，轻轻涡旋混匀，磁力架吸附2分钟，吸弃上清
重复洗涤步骤1次，最后尽量吸净残留液体
干燥：室温开盖干燥5-10分钟，直至磁珠无明显乙醇残留
洗脱：加入50-100μl洗脱液（提取RNA时用RNase-Free水），轻轻吹打混匀磁珠，65℃水浴孵育5分钟，磁力架吸附2分钟，将上清转移至新的离心管中，即得到纯化的核酸
二、自动化操作流程
试剂加载：按仪器要求将裂解液、复合消化液、磁珠复合液、磁珠缓冲液、洗涤工作液、洗脱液分别加入试剂槽对应位置
样本处理：将预处理后的组织样本加入96孔深孔板样本孔，每孔加入20μl复合消化液和20μl 1mg/ml蛋白酶K
程序设置：根据仪器型号设置以下程序参数：
步骤 温度 时间 转速
裂解 56℃ 40分钟 1200rpm
结合 室温 5分钟 1500rpm
磁分离 室温 2分钟 0rpm
洗涤1 室温 3分钟 1500rpm
洗涤2 室温 3分钟 1500rpm
干燥 37℃ 8分钟 1000rpm
洗脱 65℃ 5分钟 1200rpm
启动运行：将96孔深孔板放入仪器，启动提取程序，程序完成后收集洗脱孔中的核酸样本
核酸质量检测
浓度测定：使用紫外分光光度计检测OD260值，DNA浓度(ng/μl)=OD260×50×稀释倍数；RNA浓度(ng/μl)=OD260×40×稀释倍数
纯度判断：DNA样本OD260/OD280应在1.8-2.0之间，RNA样本OD260/OD280应在1.9-2.1之间，说明核酸纯度良好
完整性检测：通过琼脂糖凝胶电泳检测，DNA应呈现单一明亮条带，无明显拖尾；RNA应可见清晰的28S和18S条带（28S条带亮度约为18S的2倍）
注意事项
样本处理：组织样本应新鲜处理或-80℃低温保存，避免反复冻融导致核酸降解
操作环境：提取RNA时需在无RNase环境下操作，使用RNase-Free耗材和试剂
磁珠使用：磁珠复合液使用前需充分混匀，避免磁珠沉淀影响提取效率
洗涤步骤：洗涤时需彻底去除残留的洗涤液，否则会抑制下游酶促反应
洗脱条件：洗脱液体积可根据实验需求调整，体积越小核酸浓度越高，但回收率会有所降低
安全防护：实验过程中需佩戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜
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关键字： SP悬浮细胞小核酸转染试剂;SP Suspension Cell S;
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