基本信息
产品名称 | Bst 4.0冻干Buffer(含冻干赋形剂) | 货号 | P-PR1261 |
规格 | 2500Tx25 μl | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Bst 4.0 Lyophilized Buffer (with lyoprotectant)
作用机制：为Bst 4.0聚合酶的反应提供合适的缓冲环境，维持反应体系的pH值、离子强度等稳定，同时含有的冻干赋形剂可保护酶等成分在冻干过程中保持活性，便于长期保存和运输。
适用样本：配合Bst 4.0系列聚合酶使用，适用于各类等温扩增实验的样本，如临床样本、食品样本、环境样本等。
产品概述
专为Bst 4.0系列聚合酶设计的冻干缓冲液，添加了特定的冻干赋形剂，可有效保护酶的活性在冻干和储存过程中不受损失。使用时只需加入超纯水溶解，即可与Bst 4.0聚合酶、dNTP等组分配合使用，用于环介导等温扩增（LAMP）、滚环扩增（RCA）等等温核酸扩增实验，为实验提供稳定的反应环境。
产品特点
专为Bst 4.0设计：优化的缓冲液配方，适配Bst 4.0聚合酶的活性需求
冻干赋形剂保护：添加冻干赋形剂，有效保护酶在冻干和储存过程中的活性
使用灵活：与Bst 4.0聚合酶配合使用，可按需配制反应体系
稳定性好：冻干状态下长期保存，活性损失小
操作步骤
样本处理：向1.5ml EP管中加入600μl miRNA提取试剂，再加入500μl血清或血浆样本，漩涡振荡30秒充分混匀
初步分离：13000rpm离心5分钟，将上清约1ml转移至新的2ml EP管中，加入1ml异丙醇，上下颠倒混合均匀
柱式吸附：将混合液分三次加入吸附柱（每次约700μl），13000rpm离心15秒，倒掉过柱液
洗涤纯化：
向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇，13000rpm离心15秒，倒掉过滤液
向吸附柱中加入500μl无水乙醇，13000rpm离心15秒，倒掉过滤液
干燥柱体：吸附柱13000rpm空离心2分钟，去除残留乙醇，室温放置2分钟使乙醇完全挥发
RNA洗脱：在吸附柱滤芯中央加入30μl RNase-Free TE缓冲液，室温静置2分钟，13000rpm离心2分钟，收集滤液即为提取的miRNA产物
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注意事项
样本处理：
血浆抗凝剂建议使用EDTA或柠檬酸钠，避免使用肝素（会抑制PCR检测）
样本应避免反复冻融，新鲜样本建议尽快处理
试剂使用：
miRNA提取试剂含有胍盐，具有强烈腐蚀性，操作时需佩戴防护眼镜、手套和口罩
自备试剂需确保无RNase污染，避免影响RNA完整性
实验操作：
所有操作需在无RNase环境中进行，使用RNase-Free的枪头和离心管
离心过程需确保离心管盖紧，避免液体渗漏
产物检测：
由于血清/血浆中miRNA含量极低，提取产物浓度通常在5ng/μl以下，难以用常规NanoDrop测量，建议直接取10μl进行下游反转录实验
为获得更可靠数据，推荐使用特异性和灵敏度更好的TaqMan探针法进行miRNA定量检测
产物保存：提取的miRNA产物可立即用于下游实验，或分装后置于-80℃长期保存，避免反复冻融
关键字： Bst 4.0冻干Buffer(含冻干赋;Bst 4.0 Lyophilized ;
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