基本信息
中文名称:石蜡包埋组织RNA提取试剂盒
货号:P-PR1500
规格:50T、100T
英文名称:Paraffin-embedded Tissue RNA Extraction Kit
作用机制:通过脱蜡液去除石蜡,再用强裂解液破碎组织细胞,释放RNA,同时抑制RNA酶活性,去除杂质,回收石蜡包埋组织中保存的RNA,即使是长时间保存的石蜡样本也能有效提取。
适用样本:福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本。
产品概述
石蜡包埋组织是珍贵的分子生物学研究材料,但因保存时间长,提取可用于PCR的RNA存在降解和脱蜡过程中样品丢失的问题。本试剂盒专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快速提取RNA,通过独特的裂解与纯化体系,能有效逆转福尔马林对RNA的修饰,释放并保护RNA完整性,获得的RNA可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等下游实验。
试剂盒组成
(以50次提取装为例)
组分 规格
溶液A 30mL
溶液B 7.5mL
溶液C 10mL
溶液D 15mL
微量核酸沉淀剂 30mL
吸附柱(带收集管) 50套
使用说明书 1份
产品特点
一管式操作:全程在单管内完成主要流程,避免交叉污染与RNA样品丢失,提升提取稳定性。
环保脱蜡:含一步离心式脱蜡试剂,无需使用有毒的二甲苯,实验过程更安全环保。
高效除杂:配备基因组DNA清除体系,能有效去除DNA污染,提取的RNA可直接用于RT-PCR等反应。
即开即用:无需额外准备试剂,试剂盒内组分可直接用于实验,简化操作流程。
快速提取:针对不同样本,最快可在85分钟内完成提取,大幅缩短实验周期。
操作步骤
样本处理:将5片厚度为6-8μm的石蜡包埋组织切片转移至1.5mL螺旋盖离心管,加入1mL溶液A,振荡器最大速度振荡10秒。
脱蜡处理:加入75μL溶液B,振荡器最大速度振荡10秒,7000×g室温离心2分钟,待溶液分层后,小心吸弃上层液体。
样本干燥:将离心管放入真空离心机,抽干下层液体(约需1小时)。
RNA释放:加入150μL溶液C,55℃保温过夜;短暂离心后,95℃保温10分钟,逆转福尔马林对RNA的修饰。
裂解与萃取:加入0.5mL溶液D,充分震荡30秒;再加入0.1mL自备氯仿,振荡器充分振荡混匀30秒,13000×g室温离心3-5分钟。
RNA分离:吸取约0.6mL上清液至新离心管(避免触及下层有机相和中间层),加入两倍体积的微量核酸沉淀剂,振荡30秒混匀,15000×g室温离心5分钟,可见RNA沉淀形成。
洗涤沉淀:吸弃上清液,加入1mL 75%乙醇,振荡混匀30秒,15000×g室温离心1分钟,重复此步骤1次。
RNA洗脱:吸弃残留乙醇,室温放置1-2分钟,加入50-100μL RNA溶解液,室温放置2分钟,12000×g离心2分钟,收集洗脱液即为纯化RNA。
注意事项
本产品仅用于科研或工业应用,不可用于临床诊断或治疗。
操作全程需在无RNase污染环境中进行,佩戴手套、口罩,使用无RNase的枪头、离心管等耗材。
若不慎接触皮肤或眼睛,需立即用大量清水冲洗,必要时寻求医疗帮助。
样本处理需尽量快速,避免RNA降解;提取的RNA建议立即用于实验或分装后-80℃冻存。
裂解液若出现低温沉淀,使用前需65℃水浴溶解并摇匀,确保试剂有效性。
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