基本信息
产品名称 | 5min RNA纯化试剂盒 | 货号 | P-PR1313 |
规格 | 10T、50T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:5min RNA Purification Kit
作用机制:采用硅胶膜离心柱或磁珠吸附技术,在高盐条件下特异性结合RNA,快速去除样本中的蛋白质、DNA、多糖、脂类等杂质;优化的裂解液与洗脱液可在5分钟内完成RNA纯化,同时保持RNA的完整性。
适用样本:细胞、组织、血液、唾液等来源的总RNA样本,适用于快速RT-PCR、Northern Blot等实验。
产品概述
5min RNA纯化试剂盒是一种用于快速纯化RNA的试剂盒,能够在5分钟内完成RNA的提取与纯化过程。它通常采用硅基质膜吸附技术,结合优化的裂解与洗脱缓冲液,可从细胞、组织、血液等多种样本中高效提取总RNA或特定类型的RNA。试剂盒包含裂解液、结合缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液及吸附柱等组分,操作流程简便:先将样本裂解释放RNA,然后加入结合缓冲液使RNA结合到硅基质吸附柱上,经洗涤缓冲液去除杂质,最后用洗脱缓冲液将纯净的RNA洗脱下来。该试剂盒纯化的RNA纯度高、完整性好,可直接用于RT-PCR、qPCR、RNA测序、Northern Blot等后续分子生物学实验,尤其适用于需要快速获取RNA样本的实验场景。
产品特点
超快速提取:从样本处理到获得纯RNA仅需5分钟,比常规试剂盒节省80%以上时间。
高纯度RNA:采用硅基质膜吸附技术,有效去除DNA、蛋白质、杂质等,A260/A280比值≥1.9。
完整性好:优化的裂解与洗脱体系,有效保护RNA完整性,RIN值≥8.0,适用于RNA测序等高端实验。
通用性强:适用于细胞、组织、血液等多种样本,可提取总RNA、mRNA、microRNA等。
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液,按试剂瓶标注比例加入无水乙醇,充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样(杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤)加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液,充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟,期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇,充分搅拌混匀后,将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后,开启真空抽滤装置,将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内(注意不要抽干)
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ,静置2分钟后抽滤;再加入5mL洗涤液Ⅱ,静置2分钟后抽滤,重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱,放入收集管中,12000rpm常温离心3分钟,去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管,加入50-100μL预热的洗脱液,静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸,可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存:试剂盒应避光保存于2-8℃,有效期12个月;核酸富集因子避免反复冻融,使用后立即放回冰箱
水样预处理:高浊度或杂质过多的水样,需先经0.45μm滤膜过滤,避免堵塞吸附柱
操作规范:实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品,避免直接接触水样与试剂;若不慎接触皮肤或眼睛,立即用大量清水冲洗
试剂配制:洗涤液需现用现配,按比例加入无水乙醇后充分混匀,未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存:提取的核酸若长期保存,需置于-70℃环境,避免反复冻融;短期可在4℃保存24小时
器材要求:所有实验器材需为无RNA酶耗材,实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
关键字: 5min RNA纯化试剂盒;5min RNA Purificatio;
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