基本信息
产品名称 | 6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit | 货号 | P-PR1311 |
规格 | 100T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit
作用机制：采用高活性逆转录酶，在6分钟内完成RNA到cDNA的逆转录反应；试剂盒含优化的反应缓冲液与引物（随机引物或Oligo dT），可高效合成第一链cDNA，适用于各种RNA样本的快速逆转录。
适用样本：细胞、组织、血液等来源的总RNA或mRNA样本，适用于快速RT-PCR、基因表达分析等实验。
产品概述
6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit是一款用于快速合成第一链cDNA的试剂盒，仅需6分钟即可完成从RNA到cDNA的反转录反应。它包含高性能的反转录酶、反应缓冲液、dNTPs、引物等组分，优化的反应体系与程序极大地缩短了反转录时间，同时保证了反转录的效率与特异性。该试剂盒适用于多种类型的RNA模板，如总RNA、mRNA、病毒RNA等，可合成不同长度的cDNA片段。合成的cDNA可直接用于后续的PCR扩增、qPCR定量、基因克隆、文库构建等分子生物学实验。其快速反转录特性在需要快速获得cDNA样本的实验中具有显著优势，如临床快速诊断、高通量样本处理等场景。
产品特点
超快速反转录：从RNA到cDNA合成仅需6分钟，比常规试剂盒节省90%以上时间。
高反转录效率：采用高性能反转录酶，可反转录长链RNA（≥10kb）与低丰度RNA，反转录效率≥90%。
特异性强：采用Oligo(dT)与随机引物混合引物，同时适配mRNA与非编码RNA反转录。
直接下游应用：合成的cDNA可直接用于qPCR、PCR、测序等实验，无需纯化。
操作步骤
一、实验前准备
向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记
载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存
将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用
二、手工提取流程
样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）
核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸
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注意事项
实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用
还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效
若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量
提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存
若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱
关键字： 6min Fast 1st?cDNA S;
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