基本信息
中文名称：一步法超级多重荧光定量PCR试剂盒（探针）
货号：P-PR1427
规格：100反应、250反应
英文名称：One-step Ultra Multiplex Quantitative PCR Kit (Probe-based)
作用机制：将逆转录（针对RNA样本）与PCR扩增反应整合为单管体系，无需单独进行逆转录步骤；针对多个靶基因设计特异性引物与荧光探针，探针结合靶序列后，在Taq酶的5'-3'外切酶活性作用下被切割，释放荧光基团产生信号，荧光强度与扩增产物量正相关，可同时定量检测多个靶标。
适用样本：RNA样本（如组织总RNA、病毒RNA）或DNA样本（如基因组DNA、质粒DNA）
产品概述
基于TaqMan探针技术，实现多靶标基因的一步法逆转录与定量PCR扩增，无需单独进行逆转录反应。适用于RNA病毒（如新冠、流感）的多靶点联合检测、基因表达谱分析等场景，可同时检测1-8个靶标，具备高特异性与灵敏度。
产品组成（以96次反应为例）
组分 规格
2×多重PCR反应混合液 1.2mL×2管
多重探针混合液 100μL×1管
ROX参考染料（50×） 40μL×1管
无核酸酶水 1mL×1管
阳性对照品 50μL×1管
阴性对照品 50μL×1管
产品特点
一步法操作：逆转录与PCR扩增同步完成，简化实验流程
超高多重性：支持最多8个靶标同时检测，节省样本与试剂
高特异性：采用基因特异性探针，有效避免非特异性扩增
宽线性范围：检测线性范围达6个数量级，定量准确
抗干扰强：兼容复杂样本（如血液、组织）中的抑制剂
操作步骤
试剂准备：将所有试剂室温融化，瞬时离心后置于冰上
反应体系配制（20μL体系）：
试剂 体积（μL）
2×多重PCR反应混合液 10
多重探针混合液 1
ROX参考染料 0.4
RNA模板 2-5
无核酸酶水 补至20
PCR反应设置：
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 2分钟
循环扩增（40个循环）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
数据分析：采用2-ΔΔCt法进行相对定量，或通过标准曲线进行绝对定量
注意事项
试剂需避光保存，避免反复冻融，建议分装为单次使用量
操作全程需使用无核酸酶耗材，防止RNA污染
需设置阳性、阴性及无模板对照，验证反应体系可靠性
不同靶标组合可能需优化退火温度，建议通过预实验确定
荧光探针对光敏感，配制体系时需避免强光照射
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