基本信息
产品名称 | 10min病毒DNA/RNA提取试剂盒 | 货号 | P-PR1306 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:10min Viral DNA/RNA Extraction Kit
作用机制:使用高浓度胍盐裂解液迅速灭活病毒并释放核酸,结合磁珠或硅胶膜快速吸附病毒DNA/RNA,通过洗涤液去除宿主核酸、蛋白质等杂质;整个提取过程仅需10分钟,可实现病毒核酸的高效回收与纯化。
适用样本:咽拭子、鼻拭子、痰液、血清、血浆等临床样本中的病毒DNA或RNA提取。
产品概述
10min病毒DNA/RNA提取试剂盒是一款用于快速提取病毒DNA与RNA的试剂盒,能够在10分钟内完成整个提取流程,适用于病毒的快速检测与研究。该试剂盒针对病毒颗粒的特性,采用了优化的裂解与吸附技术,可从多种样本(如咽拭子、鼻拭子、痰液、血清、血浆、细胞培养上清等)中高效释放并提取病毒核酸(DNA或RNA)。试剂盒包含裂解液、结合缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液及吸附柱等组分,操作简便:先将样本与裂解液混合,快速裂解病毒颗粒释放核酸;然后将裂解液与结合缓冲液混合,使核酸吸附到吸附柱上;经洗涤缓冲液去除杂质后,用洗脱缓冲液洗脱得到纯净的病毒DNA或RNA。提取的核酸纯度高、完整性好,可直接用于PCR检测、qPCR定量、基因测序、基因分型等实验,在临床快速诊断、疫情监测等场景中具有重要应用价值。
产品特点
超快速提取:仅需10分钟即可完成从样本到纯化核酸的全过程,适合应急检测和高通量实验。
样本兼容性广:可处理咽拭子、鼻拭子、痰液、血清、血浆、细胞培养上清等多种样本类型。
核酸完整性好:采用温和裂解技术,有效保护病毒核酸不被降解,提取的核酸完整性高。
纯度达标:去除了PCR抑制物,提取的核酸可直接用于qPCR、RT-PCR等下游实验。
操作简便:无需酚氯仿抽提和酒精沉淀,离心柱式操作,步骤简单易上手。
实验前准备
试剂与耗材检查:确认PCR预混液、上下游引物、模板DNA、无酶水等试剂在有效期内,外观无浑浊、沉淀;PCR管、枪头需为无酶无菌规格。
仪器预热:提前10-15分钟启动PCR仪,设置好反应程序,确保仪器达到预设温度。
环境准备:在超净工作台内操作,佩戴无粉手套,避免交叉污染;操作前用75%酒精擦拭台面和移液器。
反应体系配制
冰上操作:将所有试剂放置于冰盒内,避免酶失活。
体系配比(以25μL体系为例):
PCR预混液(含Taq酶、dNTP、Buffer):12.5μL
上游引物(10μM):1μL
下游引物(10μM):1μL
模板DNA:1-5μL(根据模板浓度调整)
无酶水:补足至25μL
轻柔混匀:用移液器轻轻吹吸混合液3-5次,避免产生气泡;若有气泡可短暂离心去除。
分装体系:将配制好的反应液分装至PCR管中,每管25μL,盖紧管盖。
PCR仪上机反应
程序设置:根据引物Tm值和实验需求设置三步法或两步法程序:
预变性:95℃,3-5分钟
循环阶段:95℃变性30秒,55-65℃退火30秒,72℃延伸(根据片段长度调整,1kb约1分钟),循环25-35次
终延伸:72℃,5-10分钟
保温:4℃。
上机运行:将PCR管放入PCR仪样品槽,确保管盖紧密贴合;启动程序,等待反应完成。
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注意事项
无菌操作:所有试剂和耗材需高压灭菌或无菌处理,避免外源DNA污染
温度控制:酶、dNTP等试剂需-20℃储存,避免反复冻融
体系优化:根据引物Tm值、模板类型调整Mg²+浓度和退火温度
对照设置:每次实验需设置阴性对照(无模板)和阳性对照(已知阳性模板)
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