基本信息
产品名称 | HG TaqMan miRNA定量PCR试剂盒 | 货号 | P-PR1320 |
规格 | 100TX20μl | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：HG TaqMan miRNA Quantitative PCR Kit
作用机制：采用茎环结构的特异性引物，先将miRNA逆转录为cDNA；随后使用TaqMan探针进行定量PCR扩增，通过检测荧光信号的强度，实现miRNA的定量检测；试剂盒含优化的反应缓冲液与酶，可保证检测的灵敏度与特异性。
适用样本：细胞、组织、血液、血清、血浆等样本中的miRNA定量检测，适用于疾病诊断、基因调控研究等实验。
产品概述
HG TaqMan miRNA定量PCR试剂盒是一种用于microRNA（miRNA）定量检测的专用试剂盒，基于TaqMan探针技术与实时荧光定量PCR（qPCR）原理，实现对miRNA的高灵敏、高特异性定量分析。miRNA是一类长度约为20-24个碱基的非编码RNA，在基因表达调控、细胞发育、疾病发生发展等过程中发挥重要作用。该试剂盒包含针对miRNA的特异性反转录引物、TaqMan探针、定量PCR引物、反转录酶、Taq DNA聚合酶、反应缓冲液、dNTPs等组分。首先，利用特异性反转录引物将miRNA反转录为cDNA；然后，以cDNA为模板，结合TaqMan探针与定量PCR引物进行qPCR扩增，通过检测荧光信号的强度变化，实现对miRNA初始拷贝数的定量。试剂盒优化的反应体系与探针设计确保了检测的高特异性与高灵敏度，可检测到低至飞摩尔级的miRNA，适用于多种样本类型（如细胞、组织、血清、血浆等）中miRNA的表达分析，为miRNA功能研究、疾病诊断与预后评估提供了可靠的技术支持。
产品特点
miRNA特异性强：采用茎环结构的反转录引物，仅特异性反转录miRNA，避免其他RNA干扰。
灵敏度极高：可检测低至飞摩尔级的miRNA，适合微量样本分析。
定量准确：TaqMan探针技术确保定量结果的准确性和重复性，线性范围宽。
样本兼容性广：适合细胞、组织、血清、血浆等多种样本类型的miRNA检测。
操作简便：一站式试剂盒，包含反转录和qPCR所需的所有试剂，实验流程简化。
操作步骤
.配制反应体系：（以25μl体系为例）
组分 体积
10×反应缓冲液 2.5μl
MgCl₂（25mM） 1.5-2.5μl（根据模板调整）
dNTPs（10mM each） 0.5μl
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
模板DNA 1-5μl
3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl
ddH₂O 补至25μl
.PCR扩增：设置循环参数 95℃预变性3min；95℃变性30s，50-65℃退火30s，72℃延伸（1min/kb），25-35个循环；72℃终延伸10min
.产物处理：扩增产物需添加Loading Buffer后进行1%琼脂糖凝胶电泳
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注意事项
试剂预处理：使用前需按照瓶身标签提示，向漂洗液中加入指定体积的无水乙醇
沉淀处理：若裂解液、结合缓冲液出现沉淀，可在37℃水浴中加热溶解，摇匀后再使用
操作环境：实验需在洁净环境中进行，避免样本交叉污染；所有离心步骤均在室温下完成
试剂保存：试剂盒未开封时，可在15~25℃干燥环境下保存12个月；开封后蛋白酶K需置于-20℃保存，避免反复冻融
安全防护：若试剂接触皮肤或黏膜，需立即用大量自来水冲洗
关键字： HG TaqMan miRNA定量PCR;HG TaqMan miRNA Quan;
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