基本信息
中文名称:2×RAPA3G Multiplex PCR Mix
货号:P-PR1272
规格:1ml、10ml
英文名称:2×RAPA3G Multiplex PCR Mix
作用机制:预混高保真Taq DNA聚合酶、dNTPs、优化缓冲液与多重PCR增强剂;通过设计多对特异性引物,可在单管反应中同时扩增多个靶基因片段;增强剂可减少引物二聚体形成,提高多重扩增的特异性与效率,2×浓度适配直接加样。
适用样本:多基因位点同时检测体系、基因分型实验、高通量PCR筛选
产品概述
2×RAPA3G Multiplex PCR Mix是一种预混型PCR反应试剂,专为多重PCR反应优化设计。它包含了PCR反应所需的热启动DNA聚合酶、dNTPs、优化的缓冲液以及增强剂等成分,能够同时扩增多个靶标基因,广泛应用于基因分型、病原体检测、基因突变分析等研究领域。
产品组成
热启动DNA聚合酶(具有高扩增效率和特异性)
dNTPs混合物(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
优化的PCR缓冲液(含Mg²⁺等辅助因子)
反应增强剂(可提高复杂模板的扩增效率和特异性)
产品特点
多重扩增能力:可同时扩增多个靶标片段,减少实验操作步骤和样本用量。
热启动技术:有效抑制非特异性扩增,提高PCR反应的特异性和灵敏度。
扩增效率高:适用于各种复杂模板,如基因组DNA、cDNA等,能够快速得到高产量的扩增产物。
便捷易用:预混型试剂,只需添加模板和引物即可进行PCR反应,简化实验流程。
操作步骤
配制PCR反应体系:在PCR管中依次加入2×RAPA3G Multiplex PCR Mix(10μL)、上下游引物混合物(总浓度根据引物终浓度调整,通常每对引物终浓度为
0.2μM - 0.5μM)、模板DNA(1ng - 100ng,根据模板浓度调整),用无菌ddH₂O补至20μL。轻轻混匀后短暂离心,使液体集中在管底。
将PCR管放入PCR仪,设置反应程序:
预变性:95℃ 3分钟 - 5分钟
循环阶段:95℃ 15秒 - 30秒,55℃ - 65℃ 30秒 - 1分钟,72℃ 30秒 - 1分钟(根据扩增片段长度调整
延伸时间,通常1kb片段延伸1分钟),循环30 - 35次
终延伸:72℃ 5分钟 - 10分钟反应结束后,可通过琼脂糖凝胶电泳等方法检测扩增产物。
注意事项
引物设计需符合多重PCR要求,避免引物之间形成二聚体,引物长度和Tm值尽量保持一致。
模板DNA的纯度和浓度会影响扩增效果,建议使用纯化后的模板,避免抑制剂的存在。
PCR反应体系配制过程中需在冰上操作,防止酶活性下降,试剂使用后及时放回-20℃保存。
实验过程中注意避免污染,使用一次性PCR管和吸头,定期对实验环境进行清洁消毒。
不同的PCR仪可能存在温度差异,可根据实际情况微调退火温度和延伸时间。
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