基本信息
产品名称 | RAPA3G动物组织直扩PCR试剂盒 | 货号 | P-PR1271 |
规格 | 80T(50 μl 体系) | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：RAPA3G Direct PCR Kit for Animal Tissues
作用机制：优化的PCR反应体系，无需对动物组织样本进行核酸提取，可直接裂解组织细胞释放DNA，同时抑制样本中的PCR抑制剂，实现对靶基因的扩增，简化实验操作步骤。
适用样本：新鲜或冻存的动物组织样本，如鼠尾、鼠耳、肝脏、肌肉等，适用于基因分型、病原体检测等快速PCR实验。
产品概述
无需对动物组织样本进行复杂的DNA提取纯化，可直接以动物组织裂解液为模板进行PCR扩增的专用试剂盒。试剂盒内包含适配直接扩增的RAPA3G热启动DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、组织裂解试剂等组分，能有效克服动物组织中PCR抑制物的影响，实现从动物组织到PCR扩增的快速转化，大幅缩短实验周期，适用于动物基因分型、转基因检测、病原筛查等高通量样本检测场景。
产品特点
无需DNA提取：直接以动物组织裂解液为模板，省略复杂纯化步骤
超强抗抑制能力：可耐受动物组织中的血红素、粘蛋白等强抑制成分
高效扩增性能：集成RAPA3G热启动聚合酶，扩增成功率接近100%
高通量适配：优化的反应体系特别适合96/384孔板的自动化检测
实验前准备
试剂与耗材检查：确认PCR预混液、上下游引物、模板DNA、无酶水等试剂在有效期内，外观无浑浊、沉淀；PCR管、枪头需为无酶无菌规格。
仪器预热：提前10-15分钟启动PCR仪，设置好反应程序，确保仪器达到预设温度。
环境准备：在超净工作台内操作，佩戴无粉手套，避免交叉污染；操作前用75%酒精擦拭台面和移液器。
反应体系配制
冰上操作：将所有试剂放置于冰盒内，避免酶失活。
体系配比（以25μL体系为例）：
PCR预混液（含Taq酶、dNTP、Buffer）：12.5μL
上游引物（10μM）：1μL
下游引物（10μM）：1μL
模板DNA：1-5μL（根据模板浓度调整）
无酶水：补足至25μL
轻柔混匀：用移液器轻轻吹吸混合液3-5次，避免产生气泡；若有气泡可短暂离心去除。
分装体系：将配制好的反应液分装至PCR管中，每管25μL，盖紧管盖。
PCR仪上机反应
程序设置：根据引物Tm值和实验需求设置三步法或两步法程序：
预变性：95℃，3-5分钟
循环阶段：95℃变性30秒，55-65℃退火30秒，72℃延伸（根据片段长度调整，1kb约1分钟），循环25-35次
终延伸：72℃，5-10分钟
保温：4℃。
上机运行：将PCR管放入PCR仪样品槽，确保管盖紧密贴合；启动程序，等待反应完成。
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注意事项
无菌操作：所有试剂和耗材需高压灭菌或无菌处理，避免外源DNA污染
温度控制：酶、dNTP等试剂需-20℃储存，避免反复冻融
体系优化：根据引物Tm值、模板类型调整Mg²+浓度和退火温度
对照设置：每次实验需设置阴性对照（无模板）和阳性对照（已知阳性模板）
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